一、果蝇心脏发育基因调控的研究进展（论文文献综述）
王芹[1]（2020）在《BmSlit和受体BmRobo以及BmTbx20在家蚕丝腺中的表达研究》文中研究表明提高家蚕的产丝量是蚕丝业几千年来一直追求的目标。家蚕的丝腺是合成和分泌蚕丝蛋白的器官,是整个蚕丝业的生物学基础。因此,探明家蚕丝腺形成和发育的分子调控机制具有重要的理论意义和实践意义。Slit是一类在进化上高度保守的分泌型糖蛋白,它与受体Roundabout（Robo）在神经轴突导向、神经元的迁移、血管生成、癌细胞转移、白细胞趋化等多种生理病理过程中具有调节作用。家蚕丝腺被认为是果蝇唾液腺的进化同源器官。现有研究发现,Slit及其受体Robo在果蝇唾液腺发育中发挥着重要作用,但是在家蚕丝腺中的功能研究还未有相关报道。Tbx20是一种进化上高度保守的转录因子,是T-box转录因子家族成员之一,在调控心脏发生、控制细胞迁移、促进细胞增殖等过程中扮演着重要角色。在果蝇胚胎发育过程中,Tbx20的同源基因midline能够调控唾液腺的导向迁移,也可以同时调控神经系统中slit和robo基因的表达,但对于Tbx20在家蚕中的功能目前还不清楚。本研究基于前期在家蚕中已鉴定并克隆的Bmslit和Bmrobo（Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3）以及Bmtbx20基因,通过qPCR和免疫荧光染色确定Bmslit、Bmrobo及Bmtbx20基因在丝腺中的时空表达模式,探讨它们在丝腺发育中的功能,并在胚胎期采用RNAi技术,分析BmTbx20对Bmslit和Bmrobo基因的表达调控作用及对丝腺发育的影响,以期为揭示家蚕丝腺发生和发育的基因调控网络提供新的资料。主要研究结果如下:1.利用qPCR技术,系统检测了家蚕幼虫丝腺不同功能区及不同发育时期Bmslit和Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3基因的表达变化。结果表明,Bmslit和3个Bmrobo基因在家蚕前、中、后部丝腺中均有表达,而且在不同发育时期存在很大差异,但Bmslit和Bmrobo的表达特征具有较高的相似性和关联性。2.通过免疫荧光染色对BmSlit和BmRobo蛋白进行双染,发现BmRobo1a、BmRobo1b、BmRobo2/3与BmSlit在家蚕胚胎以及幼虫不同发育时期、不同功能区的丝腺细胞质中均有合成,而且在幼虫丝腺细胞膜处都存在共定位。说明BmSlit可能通过与BmRobo结合而在家蚕丝腺中发挥作用。3.分别将Bmslit和Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3基因的siRNA注射到丝腺发生前的蚕卵中进行RNA干涉。qPCR检测发现,注射48 h后的蚕卵中以上4种基因的表达均被不同程度抑制,相对表达量都比对照组极显着下调。4.取家蚕不同发育时期的丝腺组织,通过qPCR和免疫荧光染色分别从转录水平和蛋白水平上分析了Bmtbx20基因在丝腺中的时空表达模式。结果表明,Bmtbx20在家蚕丝腺不同功能区及不同发育时期均有表达,转录因子BmTbx20与BmSlit在家蚕胚胎期和幼虫期丝腺中均有合成。5.对家蚕17-18期胚胎中的Bmtbx20基因进行RNAi,qPCR测定显示,蚕卵注射后48 h,不仅Bmtbx20的相对表达量与对照组NC相比极显着下降,而且Bmslit和Bmrobo1a、Bmrobo1b、Bmrobo2/3基因的相对表达量也都存在不同程度的下调。这些结果表明,转录因子BmTbx20可能通过调控Bmslit和Bmrobo基因的表达从而调控丝腺的发育过程。6.在家蚕胚胎期对Bmslit、Bmrobo以及Bmtbx20基因进行RNAi,与对照组NC相比,Bmslit和Bmrobo基因RNAi后,丝腺的发生位置及丝腺发育情况均未见明显差异。但Bmtbx20基因RNAi后会导致胚胎发育加快,丝腺发育也相应提前,故在同一催青时间,丝腺较对照组延伸的较长。关于这些基因在丝腺发育中的详细作用机理还有待利用基因敲除等手段做进一步研究。
谭昊[2]（2020）在《基于OCT技术的生物体心脏生理特性分析及微血管造影成像》文中研究指明据世界心脏联盟统计,心血管疾病已经成为当今世界上威胁人类生命健康的重大疾病之一,被普遍认为第二次卫生革命的头号敌人。心血管疾病是指心脏、微血管、动静脉等循环系统的疾病,包括心律失常、先天性心率不齐、心力衰竭、冠心病等。心率和血压作为人体重要的生理参数,能够反映心血管的功能状况。现阶段,并未有根治心血管疾病的良好方法,治疗主要依赖普通的药物管理和预防两方面。因此,为了探索治愈心血管疾病的方法,了解心血管疾病发作的机理,需要从模式生物入手,充分掌握其生长发育过程中心血管功能参数的变化。飞蝗具备其余模式生物无可比拟的优势,可成为研究心血管发育和基因功能的强劲模型。光学相干层析成像（Optical Coherence Tomography,OCT）技术是具备无创、实时、高分辨率等特点的新型成像技术。利用弱相干光的干涉特性,以及采集样品组织的后向散射光来重建样品内部结构,得到高分辨率成像。OCT技术在生物体发育中形态学成像和功能学成像均有所应用,但在昆虫领域研究较少,尤其是对于整个生命周期中心脏功能特性的监测。因此,本文使用OCT技术监测昆虫在完整发育过程中心脏功能特性的变化,对心血管疾病的工作展开提供较大的帮助。本文首次使用OCT技术观察了飞蝗在整个生命周期（胚胎期、蝗蝻期、成虫期）中心脏发育的过程,记录了不同发育时期下生理参数的变化。其次,生命节律作为生命现象的基本特征之一,使人的生命活动呈现周期性和节奏性,而生物钟和心血管的生理功能息息相关。基于此,本文对成年飞蝗的昼夜节律进行研究,心率变化基本呈现昼高夜低的现象。最后,外界温度和光照对人体的生物钟系统均会产生影响,适宜的温度和光照对可以调节人体的生命节律。因此本文对飞蝗在不同温度和光照周期条件下的生理参数变化进行监测。清晰且高分辨率的微血管造影成像对早期心血管疾病的预防与检测是极其重要的。基于此,本文对散斑方差算法作出优化,即在数据处理之前进行动态血流和静态组织分类。为了验证此算法的可行性,对裸鼠血管区域进行造影成像,并对造影成像的图像效果进行量化分析。
孙文强[3]（2019）在《Akirin基因调控鸭成肌细胞增殖与分化的作用研究》文中研究表明Akirin基因家族在骨骼肌发育上具有重要作用。该基因家族有两个成员,Akirin1和Akirin2,研究报道鸟类基因组仅含有一个成员Akirin2。为研究鸟类Akirin2基因的功能,在鸭成肌细胞中过表达Akirin2基因、异源表达鼠Akirin1基因后,结合荧光定量、免疫荧光、蛋白印迹以及流式细胞术等手段,研究了Akirin2基因在鸭成肌细胞中的作用。主要研究结果如下:（1）将鼠Akirin1与Akirin2基因分别与多个鸟类基因组比对分析,仅在鸟类基因组中发现一个Akirin同源基因。该同源基因与鼠Akirin2基因有着80%以上的同源性,而与鼠Akirin1基因仅有41%45%的同源性。进化树结果显示,所选鸟类Akirin同源基因与其他物种Akirin2聚为一类。结构功能域分析结果显示,所选鸟类Akirin结构域与其他物种Akirin2高度相似。（2）通过低浓度马血清成功将鸭成肌细胞进行诱导分化。成功构建鸭Akirin2基因真核表达载体并将其转染至鸭成肌细胞后,生肌调控因子（MRFs）、肌细胞增强因子2（MEF2s）基因家族各成员的表达量、细胞周期的退出与细胞周期相关调控因子（Cyclin D家族与p21）的表达,以及肌管数目均无显着变化,表明过表达鸭Akirin2基因不能够影响成肌细胞分化。（3）过表达鸭Akirin2基因后,成肌细胞增殖活性显着提高。细胞周期相关调控因子（Cyclin D家族）的表达无显着变化,但胞内蛋白合成因子（S6K）的表达量显着升高。培养基添加mTOR特异性抑制剂雷帕霉素后,Akirin2基因对成肌细胞增殖活性以及胞内蛋白合成因子（S6K）的正向调控作用受到了阻断,表明鸭Akirin2能够通过mTOR/S6K通路调控成肌细胞增殖。（4）生物信息预测及双荧光素报告载体证实miR-365能够靶向结合Akirin2基因3’UTR区域。过表达miR-365后,胞内蛋白合成相关因子（mTOR、S6K）表达量显着降低,鸭成肌细胞增殖活性以及BrdU阳性细胞数目显着降低,进一步表明Akirin2基因能通过影响胞内蛋白合成相因子（mTOR、S6K）的表达调控成肌细胞的增殖。（5）异源表达Akirin1基因于鸭成肌细胞后,生肌调控因子MRF4以及肌细胞增强因子MEF2B的表达量均显着升高,同时,p38MAPK以及PI3K/Akt信号通路相关因子的表达量也显着升高。但培养基添加p38MAPK特异性抑制剂SB203580后,p-p38α和MRF4基因表达量显着降低,表明Akirin1可能通过p38MAPK信号通路介导调控成肌细胞分化。此外,培养基添加PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt和MEF2B基因表达量也显着降低,表明Akirin1也可能通过PI3K/Akt信号通路介导调控成肌细胞分化。综上,所选鸟类基因组中仅含有Akirin2的同源序列。鸭Akirin2基因与成肌细胞分化过程无关,但能够调控成肌细胞增殖,其作用可能是通过mTOR/S6K通路介导实现的。异源表达鼠Akirin1基因能诱导鸭成肌细胞分化,可能由PI3K/Akt以及p38MAPK信号通路介导。本研究明确了鸭Akirin2基因在成肌细胞增殖中的作用,为鸟类Akirin基因功能研究奠定了基础。
张民[4]（2017）在《AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响》文中研究表明1研究目的实验采用UAS-Ga14系统对果蝇的Ca2+调控基因AnxB9进行表达调控,采用特定的果蝇运动装置对果蝇进行不同期段的规律运动干预,通过检测心脏功能相应指标的变化来研究AnxB9基因表达下降联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响,探讨AnxB9基因表达下降运动心脏的适应变化和运动抗衰老功能。2研究方法将AnxB9品系雌蝇（w[1118];P{GD11750}v27493）分别与野生系w1118雄蝇和arm-Gal4雄蝇杂交,取F1代,分为对照组（AnB9/w1118）和敲低组（AnxB9/arm-Gal4）,又分别将对照组和敲低组各分为安静-对照组（1-42d-AnxB9/w1118）、安静敲低组（1-42d-AnxB9/arm-Gal4）、长训-对照组（2-42d-AnxB9/w1118）、长训-敲低组（2-42d-AnxB9/arm-Gal4）、晚训-对照组（28-42d-AnxB9/w1118）、晚训-敲低组（28-42d-AnxB9/arm-Gal4）,共6组。每组均收集处女蝇300只以上,恒温（25℃左右）,恒湿（50%左右）,12小时昼/夜循环交替光照饲养。根据计划中的运动方案采用果蝇运动装置对果蝇进行规律运动训练,保持运动负荷恒定不变,运动装置转速设定为0.2r/s,5天/周,2.5h/天,运动干预方案结束24h后取材。指标检测:通过qRT-PCR技术检测对照组（AnxB9/w1118）和敲低组（AnxB9/arm-Gal4）AnxB9基因mRNA表达水平;于第43天（约为人类中老年时期）,各组随机取40只果蝇,采用M-mode心动图检测果蝇心脏功能;各组随机取100只果蝇检测果蝇运动能力;各组随机取120只果蝇统计生命周期（相同饲养环境,每2天更换一次培养基,同步记录果蝇死亡只数,绘制果蝇存活曲线,计算平均生存期）。3研究结果3.1果蝇AnxB9基因mRNA表达量检测结果检测结果显示,与 AnxB9/w1118组相比,AnxB9/arm-Gal4组果蝇AnxB9的相对表达量有29%的下降,具有非常显着性差异（P<0.01）。3.2果蝇心脏功能M-mode心动图检测结果HP、DI、FS、AI、CI的双因素方差分析结果显示均存在显着的交互效果（P<0.05）;SI、FL显示无交互作用（P>0.05）,无主效应（P>0.05）。HP 分析结果显示（Test of Simple main effect）,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118 水平时,2-42d组显着高于1-42d组（P<0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,各组均无显着差异（P>0.05）。在 Exercise Level=1-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组HP 显着高于 AnxB9/w1118组（P<0.01）;在 Exercise Level=2-42d水平时AnxB9/arm-Gal4组HP与AnxB9/w1118组无显着差异（P>0.05）;在 Exercise Level=28-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。DI 分析结果显示,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,2-42d 组极显着高于1-42 组（P<0.01）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,1-42d组、2-42d 组、28-42d 组之间均不存在显着性差异（P>0.05）。在 Exercise Level=1-42d 和 28-42d平时,AnxB9/arm-Gal4组DI均极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）;在 Exercise Level=2-42d水平时,AnxB9/arm-Gal4 组与AnxB9/w1118组 DI 无明显差异（P>0.05）。AI 数据分析结果显示,在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,1-42d组、2-42d组、28-42d组之间均不存在显着差异（P>0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4 水平时,1-42d组和 28-42d组极显着高于 2-42d 组（P<0.01）。在 Exercise Level=1-42d 和 2-42d水平时,AnxB9/arm-Gal4 组与 AnxB9/w1118 组不存在显着差异（P>0.05）;在 Exercise Level=28-42d 水平时,AnsB9/arm-Gal4 组极显着高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。进一步对心律不齐（包括心脏停搏、延长收缩和舒张功能不全）指标进行分析,结果显示 1-42d-AnxB9/arm-Gal4组（52.4%,14.3%）和28-42d-AnxB9/arm-Gal4组（57.7%,11.5%）心脏停搏和延长收缩发生率明显高于其他各组。各组舒张功能不全发生率均比较高,其中最高为 28-42d-AnxB9/w1118组（90.3%）,其次是28-42d-AnxB9/arm-Gal4 组（65.4%）、1-42d-AnxB9/w1118组、（60.7%）和2-42d-Anx9/w1118组（55.2%）均超过了 50%的发生率。FS数据分析结果显示,在Gene Expression Level=AnxB9/w1118水平时,2-42d 组显着高于1-42 组（P<0.05）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4水平时,各组均没有显着性的差异（P>0.05）。在 Exercise Level=l-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组明显高于AnxB9/w1118组（P<0.01）;在Exercise Level=2-42d、28-42d水平时,均无显着性差异（P>0.05）。另外,各组之间SI,FL交互作用和主效应分析均未呈现出显着性（P>0.05）。3.3运动能力检测分析结果CI分析结果显示,在 Exercise Level=1-42d 水平时,AnxB9/arm-Gal4 组明显高于AnxB9/w1118组（P<0.01）。在Gene Expression Level=AnxB9/w1118 水平时,2-42d 组显着高于 1-42d 组（P<0.01）和 28-42d 组（P<0.01）;在 Gene Expression Level=AnxB9/arm-Gal4水平时,1-42d组和2-42d组之间无显着差异,两组均显着高于28-42d组（P<0.01,P<0.01）。3.4生命周期检测分析结果在 Exercise Level=1-42d、2-42d 和 28-42d 时 AnxB9/arm-Gal4组平均生存期均高于 AnxB9/w1118 组（P<0.01）。在 Gene Expression Level=AnxB9/w1118和 AnxB9/arm-Gal4 时,2-42d 组和 28-42d 组平均生存期均明显高于1-42d组（P<0.01）。与1-42d-AnxB9/w1118组相比,其它各组随时间变化趋势线位置明显右移。与1-42d-AnxB9/w111组平均生存期61.13天相比,1-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期70.15天,延寿百分比达到了 14.8%;2-42d-AnxB9/w1118组平均生存期69.74天,延寿百分比达到了 14.1%;2-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期73.75天,延寿百分比达到了 20.6%;28-42d-AnxB9/w1118组平均生存期 66.93 天,延寿百分比达到了 9.5%;28-42d-AnxB9/arm-Gal4组平均生存期73.90天,延寿百分比达到了20.9%。4 结论4.IAnxB9基因表达降低或规律运动训练单一实施时,能够显着增长增龄果蝇的心动周期,心动周期的改变主要是由于舒张间期的增长。在不参与长期运动训练时,AnxB9基因表达降低可以提高果蝇缩短分数。在AnxB9基因正常表达时,运动能够提高果蝇的缩短分数。4.2AnxB9基因表达降低参与中老龄规律运动训练时,心脏停搏、延长收缩症状发生率会升高,而舒张功能不全发生率较对照组会降低。AnxB9基因表达降低并参与长期规律运动训练能够降低心律不齐症状的发生率。4.3长期规律运动训练有助于提高果蝇的运动能力。在不参与运动训练的条件下,AnxB9基因表达降低同样能够提高果蝇的运动能力。而在AnxB9基因表达降低的情况下,参与中老龄期的运动训练可能会使果蝇的运动能力下降。4.4AnxB9基因表达降低或参与规律运动训练均能延长果蝇的生命周期。
颜尔聪[5]（2017）在《果蝇TSMR1对心脏发育基因启动子活性的影响》文中认为TSMR1是本实验室克隆的人类心脏发育的候选基因,其功能研究目前还没有相关的研究报道。本实验室的前期研究成结果显示,在果蝇胚胎发育过程中,TSMR1影响果蝇胚胎心脏的发育过程。为了研究TSMR1调控心脏发育的作用机制,本文探讨TSMR1是否对心脏发育基因的启动子起调控作用。本文提取了野生型成虫果蝇的DNA,设计引物克隆果蝇心脏发育相关基因（Eve,Zfh-1,Odd,Prc,Svp,Smox）,将扩增的基因片段通过一步克隆法连接至p GL3-basic荧光素酶报告载体,构建成p GL3-Eve,p GL3-Zfh1,p GL3-Odd,p GL3-Prc,p GL3-Svp和p GL3-Smox质粒,电泳测序鉴定。将这些质粒与PCMV-myc-TSMR1共转染至HEK293细胞,同时单转启动子报告质粒、p GL3-basic和PCMV-myc质粒。以p RL-TK作为内参,建立双荧光素酶报告系统。对荧光素酶报告基因检测系统分析心脏发育相关基因的启动子活性,并用独立样本t检验方法进行统计分析。结果表明:TSMR1基因能够增强心脏发育相关基因启动子的转录活性。为了进一步研究TSMR1是否通过结合在基因的启动子区域起转录调控作用,确定核心启动子区域,将心脏发育基因Svp、Prc、Smox和Zfh1的启动子区域进行分段分析,分别分为5-6段片段大约长为500bp的启动子片段。通过PCR扩增反应,将扩增片段通过一步克隆法连接至p GL3-basic荧光素酶报告载体,构建成荧光素酶报告质粒。同样利用荧光素酶报告系统检测启动子活性。结果表明:Svp核心启动子区域为-465—+40bp;Prc核心启动子区域为-1426—-900bp;Smox核心启动子区域为-1205—-646bp;Zfh1核心启动子区域为-2646—-2127bp。综上所述,本文证明果蝇TSMR1影响心脏发育基因启动子的活性,并鉴定出其影响心脏发育基因的核心启动子区域。该结果为进一步研究TSMR1在果蝇心脏发育过程中的调控机制奠定了基础。
朱莎莎,吴秀山,袁婺洲[6]（2016）在《pygo基因对心脏功能的调控及其研究进展》文中提出Wg/Wnt信号参与调控多种组织的发育,尤其在心脏发育和心脏衰老过程中发挥重要的作用。pygo作为Wnt信号途径的一个新成员,可能依赖于Wnt信号调控心脏发育,而最新发现pygo敲低品系引起的成体心脏功能缺陷与Wnt信号缺失在心脏中的表型具有显着性差异,表明pygo调控成体心脏功能不依赖于经典Wnt信号,可能存在新的调控机制。主要对pygo基因在调控心脏发育和心脏衰老中的功能以及在果蝇和哺乳动物中pygo基因调控心脏功能分子机制的研究进展进行了综述。虽然pygo不依赖经典Wnt信号在成体心脏中发挥作用,但显性负抑制TCF突变体引起严重的成体心脏生理功能缺陷,与pygo表型一致,暗示着pygo可能依赖与TCF类似因子相互作用发挥功能。其次,pygo能跨越TCF或Lgs直接与Wnt信号靶基因相互作用。此外,Pygo蛋白能与Lgs相互作用形成Pygo-BCL9/Lgs-H3K4me复合物调节Wnt信号靶基因,且甲基转移酶HMT核心组件WDR5与Pygo蛋白的相互作用能促进PHD结构域与H3K4的结合,表明pygo调节成体心脏功能与表观遗传学修饰也具有一定的相关性。
龚琳[7]（2011）在《果蝇心脏发育候选基因Nulp1的相互作用蛋白研究》文中指出正常的心脏发育过程受到多种基因的精确调控,发育过程中任一基因的改变都可能导致先天性心脏病的发生。本实验室前期筛选出一个新的人类心脏发育候选基因Nulp1,利用果蝇模型初步证明该基因的同源基因CG7927与心脏发育有关。本文进一步鉴定该基因的相互作用蛋白,探讨其在心脏发育过程中的信号通路。果蝇CG7927基因（登录号为NM 139917.2）位于果蝇3号染色体上,mRNA长度为2500 bp,含7个外显子,6个内含子。该基因包含一个bHLH和一个功能未知命名为DUF654的结构域,这2个结构域高度进化保守。本实验室前期的研究提示,人类Nulp1、Fhl2和fi-catenin基因可能有相互作用。本文将果蝇Nulp1、Fhl2和β-catenin基因首先克隆到pMD18-T载体中,经酶切证实后,送到公司测序,证明克隆的质粒正确,再分别构建成pCMV-myc-Nulp1, pCMV-tag2B-Fhl2和pCMV-tag2B-Arm质粒。将pCMV-myc-Nulp1和pCMV-tag2B-Fhl2转入HEK293细胞系,经提取蛋白和转膜后,分别用flag和myc单克隆抗体进行westernblot检测,检测两者之间是否有相互作用。研究结果表明,Nulp1和Fhl2蛋白全长存在相互作用。为了进一步分析该两种蛋白的具体结合位点,将Nulp1基因按结构域的组成分成6个区段,分别克隆构建成pCMV-myc-Nulp1-P1, pCMV-myc-Nulp1-P2, pCMV-myc-Nulp1-P3等3个亚质粒,将Fhl2基因全长分别构建成pCMV-tag2B-Fhl2-PET和pCMV-tag2B-Fhl2-6LIM亚质粒。将这些质粒分别成组转入HEK293细胞系中进行westernblot分析,结果表明pCMV-myc-Nulp1-P1, pCMV-myc-Nulp1-P2和pCMV-myc-Nulp1-P3与pCMV-tag2B-Fhl2有相互作用。同时将pCMV-myc-Nulp1和pCMV-tag2B-Arm转入HEK293细胞系中,经westernblot分析表明,Nulp1和Arm全长可能不存在相互作用。为了证实Nulp1、Fhl2和Arm在细胞内的分布情况,分别将这两个基因构建成表达绿色荧光的质粒pEGFP-C1-Nulp1,和pEGFP-N1-Arm,表达红色荧光的质粒pdsRED2-N1-Fhl2和pdsRED2-N1-Arm。进一步将这些质粒成组转入COS7细胞系中研究这些基因在细胞内的蛋白分布及相互作用情况。结果表明,Nulp1蛋白在细胞内位于细胞质,Fhl2蛋白位于细胞核和细胞质中,Arm蛋白位于细胞质和细胞核中。Nulp1蛋白与Fhl2蛋白在细胞质有共定位,Nulp1蛋白与Arm蛋白在细胞质有共定位,Fhl2与Arm蛋白在细胞质和细胞核都有共定位。上述结果表明,Nulp1和Fhl2在细胞内有直接相互作用,Nulp1和Arm蛋白可能有间接的相互作用,三者之间是否组成三元复合体有待深入研究。另外本文还制备了Nulp1和Lefty2多克隆抗体,westernblot分析表明,Nulp1多克隆抗体的效价为1：2000。取果蝇每1.5小时发育阶段的胚胎蛋白进行westernblot结果表明Nulp1蛋白在果蝇胚胎发育的0-16小时阶段均有表达,但胚胎发育17小时无表达。在果蝇幼虫和成虫阶段Nulp1均有表达。Lefty2多克隆抗体效价为1：3000,但斑马鱼胚胎的western结果表明该抗体的特异性差不适合进一步的应用。
彭忠禄[8]（2008）在《Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究》文中研究指明心脏发育是一个错综复杂的过程,在分子机理上被一套进化上保守的转录因子（NK2、MEF2、GATA、Tbx和Hand等）控制,它们决定心脏细胞的发育方向,决定了编码收缩蛋白基因的表达和心脏结构形态的建成。同时,它们在神经发生、心肌细胞发生、血细胞发生和癌细胞发生过程中也发挥着重要的调节作用。本文研究的Yippee基因编码一个高度保守序列的锌指结合蛋白,从真菌到人类的68种真核生物中都发现了它的同源蛋白。Yippee在果蝇发育的不同阶段以及在人类胎儿的不同组织中广泛表达,提示Yippee可能具有重要的生物学功能。2003年,通过酵母双杂交作用绘制的果蝇蛋白相互作用图谱显示,Yippee基因通过CG15676基因与心脏发育相关基因Wg、Mef2等有联系,即Yippee基因可能影响心脏发育调控基因的信号途径,故推测Yippee可能与心脏发育相关。我们采用RT-PCR的方法扩增果蝇Yippee基因cDNA,构建pUAS-Yippee-IRES-GFP绿色荧光过表达质粒,再通过果蝇胚胎显微注射和mini-white标记基因筛选建立了转基因果蝇品系。将该转基因品系与Hand-GAL4杂交、RNA干扰品系分别与Hand-GFP品系杂交,在荧光显微镜下观察杂交后代的心管和淋巴腺的表型改变,以期来确定Yippee基因在心脏发育调控中的可能作用
常在,杨中州[9]（2007）在《心脏发育过程中的信号调控机制研究》文中研究说明我国是出生缺陷高发国家,其中先天性心脏病在各类出生缺陷中居于首位,严重地影响我国的人口素质[1]。同样,后天性心脏血管疾病（心血管疾病）也是影响国民健康和社会发展的主要疾病[2]。近年来研究表明,所谓"后天性"心脏血管疾病虽然大多不在胚胎期表现出功能异常,但遗传因素在发病过程中也起关键作用,因此,"后天性"心血管疾病也有其发育生物学基础。在一些心血管疾病中,胚胎发育基因如ANF和β-MHC的表达说明胚胎发育的某些机制参与了发病过程。由于出生缺陷和心血管疾病的防治是我国公共卫生和社会发展中亟待解决的重大健康问题,了解心血管系统正常发生发育规律和机制及发病机理并在此基础上建立新的防治策略和防治措施是生命科学需要解决的重大基础科学问题[1-2]。本文主要综述了目前模式动物,特别是小鼠心脏发育过程中的信号传导调控机制的研究现状及进展。
吴秀山[10]（2004）在《利用模式生物果蝇研究人类心脏发育的基因调控》文中研究说明心脏病已成为威胁人类生命和健康的“第三号杀手”。研究表明 ,先天性心脏病的发生主要是由于控制心脏发育的基因产生突变 ,或是由这些基因的时空表达失误引起的。果蝇由于具有其它模式生物所不可比拟的优势 ,再一次成为心脏发育和基因功能研究的先驱 ;与此相关的研究成果使心脏发育的基因调控研究取得“零”的重大突破 ,从而推动了脊椎动物心脏发育基因控制研究的迅速发展。目前 ,对于人类心脏早期发育的调控机制仍知之甚少 ,本文讨论了利用果蝇模型研究人类心脏早期发育基因调控的优点与不足
二、果蝇心脏发育基因调控的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、果蝇心脏发育基因调控的研究进展（论文提纲范文）
（1）BmSlit和受体BmRobo以及BmTbx20在家蚕丝腺中的表达研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 家蚕丝腺研究进展 |
| 1.1.1 家蚕丝腺的结构及功能 |
| 1.1.2 家蚕丝腺的发生和发育 |
| 1.1.3 家蚕丝腺发育的调控机理 |
| 1.2 Slit-Robo信号通路的研究进展 |
| 1.2.1 Slit-Robo家族简介 |
| 1.2.2 Slit-Robo信号通路基本结构 |
| 1.2.2.1 Slit基本结构 |
| 1.2.2.2 Robo基本结构 |
| 1.2.3 Slit-Robo信号通路的主要功能 |
| 1.2.3.1 对神经轴突的导向作用 |
| 1.2.3.2 调节细胞迁移 |
| 1.2.3.3 参与器官形成 |
| 1.3 Tbx20的研究进展 |
| 1.3.1 T-box家族简介 |
| 1.3.2 tbx20基因的鉴定 |
| 1.3.3 转录因子Tbx20的功能研究 |
| 1.3.3.1 调控心脏的发育 |
| 1.3.3.2 控制细胞的迁移 |
| 1.3.3.3 促进心肌细胞的增殖 |
| 1.3.4 tbx20的表达调控机制 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试剂及配制 |
| 2.1.2.1 试剂及试剂盒 |
| 2.1.2.2 相关试剂的配制 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.1.4 生物信息学分析工具及数据处理软件 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 Bmslit、Bmrobo和 Bmtbx20 基因在家蚕丝腺中的表达测定 |
| 2.2.1.1 取材 |
| 2.2.1.2 家蚕丝腺总RNA的提取 |
| 2.2.1.3 RNA反转录合成c DNA |
| 2.2.1.4 qPCR引物设计 |
| 2.2.1.5 qPCR反应体系及程序 |
| 2.2.1.6 数据处理与分析 |
| 2.2.2 BmSlit、BmRobo和 BmTbx20 蛋白在家蚕丝腺中的表达定位 |
| 2.2.2.1 抗体稀释 |
| 2.2.2.2 家蚕丝腺解剖与染色前处理 |
| 2.2.2.3 免疫荧光染色 |
| 2.2.3 Bmslit、Bmrobo和 Bmtbx20 基因RNAi对家蚕胚胎期丝腺发育的影响分析 |
| 2.2.3.1 siRNA的设计与注射液的配制 |
| 2.2.3.2 显微注射前准备工作 |
| 2.2.3.3 注射卵的制备 |
| 2.2.3.4 蚕卵的显微注射 |
| 2.2.3.5 RNAi对家蚕胚胎期Bmslit、Bmrobo和 Bmtbx20 基因表达水平影响测定 |
| 2.2.3.6 RNAi对家蚕胚胎发育和丝腺发生的影响观察 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 Bmslit和 Bmrobo在家蚕幼虫丝腺不同功能区及不同发育时期的表达模式 |
| 3.1.1 Bmslit和 Bmrobo在家蚕幼虫前部丝腺中的表达变化 |
| 3.1.2 Bmslit和 Bmrobo在家蚕幼虫中部丝腺中的表达变化 |
| 3.1.3 Bmslit和 Bmrobo在家蚕幼虫后部丝腺中的表达变化 |
| 3.2 BmSlit和 BmRobo在家蚕丝腺不同功能区及不同发育时期的组织定位 |
| 3.2.1 BmSlit和 BmRobo在家蚕胚胎期丝腺中定位 |
| 3.2.2 BmSlit和 BmRobo在家蚕幼虫期前部丝腺中共定位 |
| 3.2.3 BmSlit和 BmRobo在家蚕幼虫期中部丝腺中共定位 |
| 3.2.4 BmSlit和 BmRobo在家蚕幼虫期后部丝腺中共定位 |
| 3.3 Bmslit和 Bmrobo基因RNAi对家蚕胚胎期相关基因表达的影响 |
| 3.3.1 RNAi对家蚕胚胎期Bmslit基因表达水平的影响 |
| 3.3.2 RNAi对家蚕胚胎期Bmrobo1a基因表达水平的影响 |
| 3.3.3 RNAi对家蚕胚胎期Bmrobo1b基因表达水平的影响 |
| 3.3.4 RNAi对家蚕胚胎期Bmrobo2/3 基因表达水平的影响 |
| 3.4 转录因子BmTbx20 在家蚕丝腺中的表达定位及其对Bmslit和 Bmrobo的表达调控 |
| 3.4.1 Bmtbx20在家蚕幼虫丝腺不同功能区及不同发育时期的表达模式 |
| 3.4.2 BmTbx20和BmSlit在家蚕丝腺不同功能区及不同发育时期的组织定位 |
| 3.4.3 BmTbx20 调控Bmslit和 Bmrobo的表达 |
| 3.5 Bmslit、Bmrobo及 Bmtbx20 基因RNAi对家蚕胚胎发育和丝腺发生的影响 |
| 3.5.1 Bmslit、Bmrobo及 Bmtbx20 基因RNAi对家蚕胚胎发育的影响 |
| 3.5.2 Bmslit、Bmrobo及 Bmtbx20 基因RNAi对家蚕丝腺发生的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
（2）基于OCT技术的生物体心脏生理特性分析及微血管造影成像（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 心血管疾病的研究意义及背景 |
| 1.2 医学影像技术之光学相干层析成像技术 |
| 1.2.1 OCT技术的发展历史及研究现状 |
| 1.2.2 OCT技术成像原理 |
| 1.2.3 OCT技术分类 |
| 1.2.4 系统关键性能参数 |
| 1.2.5 应用领域 |
| 1.3 选题背景及意义 |
| 1.4 论文结构安排 |
| 第二章 OCT技术在发育生物学中的应用 |
| 2.1 OCT在发育生物学中的应用现状 |
| 2.1.1 形态学成像的应用 |
| 2.1.2 功能成像的应用 |
| 2.2 生物体心血管功能发育的评估方法 |
| 2.2.1 评价心血管功能发育的重要参数 |
| 2.2.2 评估心血管功能发育的方法 |
| 2.2.3 OCT监测心血管发育的原理 |
| 2.3 OCT微血管造影成像原理及分类 |
| 2.3.1 OCT微血管造影成像原理 |
| 2.3.2 OCTA技术分类 |
| 2.3.3 OCTA技术面临的问题及解决办法 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 OCT对生物体心脏功能的活体监测 |
| 3.1 模式生物的选取 |
| 3.1.1 飞蝗简介 |
| 3.1.2 飞蝗作为模式生物的优势 |
| 3.2 OCT实验装置及监测方法 |
| 3.2.1 实验对象的制备 |
| 3.2.2 OCT装置及测量方法 |
| 3.3 飞蝗发育周期中心脏功能的监测 |
| 3.3.1 胚胎期 |
| 3.3.2 蝗蝻期及成虫期 |
| 3.4 生物节律对心脏功能的影响 |
| 3.5 外界环境对心脏功能的影响 |
| 3.5.1 温度对心脏功能的影响 |
| 3.5.2 光照周期对心脏功能的影响 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 微血管网络光学相干造影成像 |
| 4.1 光学相干血流造影成像机制 |
| 4.2 基于空间投影的微血管造影 |
| 4.2.1 散斑方差算法 |
| 4.2.2 模型的训练 |
| 4.2.3 实验结果 |
| 4.3 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
（3）Akirin基因调控鸭成肌细胞增殖与分化的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 成肌细胞与生肌调控 |
| 1.1 成肌细胞的起源 |
| 1.2 成肌细胞的增殖与分化过程 |
| 1.3 调控成肌细胞增殖与分化的关键因子 |
| 1.3.1 生肌调控因子 |
| 1.3.1.1 生肌决定因子(MyoD) |
| 1.3.1.2 成肌因子5(Myf5) |
| 1.3.1.3 肌细胞生成素(MyoG) |
| 1.3.1.4 成肌调节因子4(MRF4) |
| 1.3.2 肌细胞増强因子2(Myocyte Enhacer Factors2,MEF2s) |
| 1.3.2.1 肌细胞増强因子2A(MEF2A) |
| 1.3.2.2 肌细胞増强因子2B(MEF2B) |
| 1.3.2.3 肌细胞増强因子2C(MEF2C) |
| 1.3.2.4 肌细胞増强因子2D(MEF2D) |
| 1.3.3 细胞周期调控因子 |
| 1.4 调控成肌细胞增殖与分化的信号通路 |
| 1.4.1 MAPK信号通路 |
| 1.4.2 PI3K/Akt信号通路 |
| 2 Akirin基因家族研究进展 |
| 2.1 发现与成员命名 |
| 2.2 基因组结构组成及分子进化 |
| 2.3 表达模式 |
| 2.4 主要功能 |
| 2.4.1 Akirin基因与骨骼肌发育 |
| 2.4.2 Akirin基因与先天性免疫 |
| 2.4.3 Akirin基因与肿瘤发生 |
| 3 鸟类Akirin2 基因研究进展 |
| 4 研究内容和目的意义及研究思路 |
| 4.1 研究内容和目的意义 |
| 4.2 技术路线 |
| 第二章 Akirin基因家族分子进化分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 所用网站 |
| 2.2 所用软件 |
| 2.3 系统进化树构建 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 鸟类Akirin基因blast比对分析 |
| 3.2 Akirin基因家族系统进化分析 |
| 3.3 Akirin基因家族保守蛋白结构域分析 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 过表达Akirin2 对鸭成肌细胞分化的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试剂 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 药品和试剂 |
| 2.1.3 主要试验仪器 |
| 2.1.4 常用试剂配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 总RNA的提取及质量检测 |
| 2.2.2 cDNA的合成 |
| 2.2.3 鸭Akirin2 基因真核表达载体构建及酶切鉴定 |
| 2.2.4 鸭成肌细胞培养 |
| 2.2.5 鸭成肌细胞诱导分化 |
| 2.2.6 成肌细胞RNA的提取及反转录 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR |
| 2.2.8 Western Blot |
| 2.2.9 细胞周期测定 |
| 2.2.10 My HC免疫荧光染色 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 鸭成肌细胞分化过程中生肌调控因子表达模式 |
| 3.2 鸭pEGFP-N1-Akirin2 载体转染效率 |
| 3.3 过表达鸭Akirin2 基因对MRFs和 MEFs表达的影响 |
| 3.4 过表达鸭Akirin2 基因对成肌细胞细胞周期的影响 |
| 3.5 过表达鸭Akirin2 基因对My HC表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 过表达Akirin2 对鸭成肌细胞增殖的影响 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试剂 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 药品和试剂 |
| 2.1.3 主要试验仪器 |
| 2.1.4 常用试剂配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 总RNA的提取及质量检测 |
| 2.2.2 cDNA的合成 |
| 2.2.3 鸭pEGFP-N1-Akirin2 载体的构建 |
| 2.2.4 鸭成肌细胞培养 |
| 2.2.5 pEGFP-N1-Akirin2 重组质粒转染以及雷帕霉素处理成肌细胞 |
| 2.2.6 成肌细胞RNA的提取及反转录 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR |
| 2.2.8 Western Blot |
| 2.2.9 CCK-8 细胞增殖活性检测 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 过表达鸭Akirin2 对成肌细胞细胞活性的影响 |
| 3.2 过表达鸭Akirin2 对周期因子表达的影响 |
| 3.3 过表达鸭Akirin2 基因对蛋白代谢调控因子表达的影响 |
| 3.4 雷帕霉素对鸭Akirin2 基因调控胞内蛋白代谢相关因子表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第五章 miR-365 介导Akirin2 表达对鸭成肌细胞增殖的影响 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试剂 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 药品和试剂 |
| 2.1.3 主要试验仪器 |
| 2.1.4 常用试剂配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 总RNA的提取及质量检测 |
| 2.2.2 cDNA的合成 |
| 2.2.3 双荧光素酶报告载体及其突变载体的构建 |
| 2.2.4 鸭成肌细胞培养 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR |
| 2.2.6 Western Blot |
| 2.2.7 BrdU免疫荧光染色 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 不同物种Akirin23’UTR区域保守性分析 |
| 3.2 鸭Akirin23’UTR的 microRNA预测及双荧光素酶报告载体构建 |
| 3.3 过表达miR-365 对鸭成肌细胞增殖活性的影响 |
| 3.4 过表达miR-365 对胞内蛋白代谢相关因子表达的影响 |
| 3.5 过表达miR-365 对周期蛋白相关调控因子表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第六章 异源表达Akirin1 影响鸭成肌细胞分化的分子机制 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试剂 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 药品和试剂 |
| 2.1.3 主要试验仪器 |
| 2.1.4 常用试剂配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 总RNA的提取及质量检测 |
| 2.2.2 cDNA的合成 |
| 2.2.3 鼠pEGFP-N1-Akirin1 载体构建 |
| 2.2.4 鸭成肌细胞培养 |
| 2.2.5 鸭成肌细胞诱导分化 |
| 2.2.6 pEGFP-N1-Akirin1与LY294002或SB203580 处理成肌细胞 |
| 2.2.7 成肌细胞RNA的提取及反转录 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR |
| 2.2.9 Western Blot |
| 2.2.10 细胞周期测定 |
| 2.2.11 免疫荧光染色 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 pEGFP-N1-Akirin1 载体转染效率检测 |
| 3.2 异源表达鼠Akirin1 基因对生肌调控因子表达的影响 |
| 3.3 异源表达鼠Akirin1 基因对p38MAPK信号通路相关因子表达的影响 |
| 3.4 SB203580 与鼠Akirin1 共处理对p38MAPK/MRF4 相关基因表达的影响 |
| 3.5 异源表达鼠Akirin1 基因对生肌调控因子增强子表达的影响 |
| 3.6 异源表达鼠Akirin1 基因对IGF-II/PI3K/Akt相关因子表达的影响 |
| 3.7 LY294002 与鼠Akirin1 共处理对IGF-II/PI3K/Akt相关基因表达的影响 |
| 3.8 异源表达鼠Akirin1 基因对成细胞周期相关因子表达的影响 |
| 3.9 LY294002 与鼠Akirin1 共处理对细胞周期相关因子表达的影响 |
| 3.10 异源表达鼠Akirin1 基因对成肌细胞肌管生成的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第七章 总结 |
| 1 主要结论 |
| 2 创新点 |
| 3 下一步需开展的工作 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 果蝇品系来源及培养 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2.1 主要仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验方案 |
| 2.3.1 杂交及分组方案 |
| 2.3.2 果蝇运动方案 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.4.1 qRT-PCR检测 |
| 2.4.2 M-mode心动图检测 |
| 2.4.3 运动能力检测 |
| 2.4.4 生命周期检测 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 果蝇心脏AnxB9基因mRNA的RT-PCR检测结果 |
| 3.2 果蝇心脏功能M-mode心动图分析结果 |
| 3.3 运动能力检测分析结果(攀爬指数) |
| 3.4 生命周期检测分析结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 4.1 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇心脏功能的影响 |
| 4.2 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇运动能力的影响 |
| 4.3 规律运动联合AnxB9基因表达下降对增龄果蝇生命周期的影响 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 规律运动、AnxB9基因、心脏功能以及衰老变化的研究综述 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 科研情况 |
（5）果蝇TSMR1对心脏发育基因启动子活性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 果蝇是心脏发育研究的模式动物 |
| 1.2 果蝇心脏的发育特征 |
| 1.3 果蝇心脏发育的相关基因及信号途径 |
| 1.3.1 Eve基因和Zfh-1 基因 |
| 1.3.2 Odd基因 |
| 1.3.3 Svp基因 |
| 1.3.4 TGF-β途径以梯度依赖性调控细胞间相互作用 |
| 1.4 双荧光素酶报告系统 |
| 1.5 本课题的研究意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 酶类和试剂盒 |
| 2.1.2 菌株和质粒 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 缓冲液 |
| 2.1.5 使用仪器 |
| 2.1.6 生物信息学分析的常用软件与数据库 |
| 2.1.7 实验中所使用的果蝇品系 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 常用试剂及培养基配制 |
| 2.2.2 果蝇基因组DNA的制备 |
| 2.2.3 Zfh1、Svp、Eve、Prc、Smox、Odd基因的生物信息学分析 |
| 2.2.4 引物设计与合成 |
| 2.2.5 PCR扩增 |
| 2.2.6 PCR产物的纯化回收 |
| 2.2.7 Clon Express~(TM) Ⅱ同源重组(一步克隆法)实验 |
| 2.2.8 感受态细胞的制备(CaCl_2法) |
| 2.2.9 连接产物转化(热休克法) |
| 2.2.10 质粒的小量制备 |
| 2.2.11 阳性克隆的筛选与鉴定 |
| 2.2.12 荧光素酶报告系统分析 |
| 第三章 实验结果与讨论 |
| 3.1 心脏发育基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.1 pGL3-Eve基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.2 pGL3-Smox基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.3 pGL3-Odd基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.4 pGL3-Prc基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.5 pGL3-Svp基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.1.6 pGL3-Zfh1 基因启动子报告质粒的构建 |
| 3.2 果蝇TSMR1对心脏发育基因启动子转录活性研究 |
| 3.2.1 TSMR1 基因在HEK293 细胞中的表达情况 |
| 3.2.2 TSMR1对心脏发育基因启动子活性的影响 |
| 3.3 心脏发育基因启动子分段研究 |
| 3.3.1 Svp基因启动子分段研究 |
| 3.3.2 Prc基因启动子分段研究 |
| 3.3.3 Smox基因启动子分段研究 |
| 3.3.4 Zfh1基因启动子分段研究 |
| 第四章 其他工作 |
| 第五章 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
（6）pygo基因对心脏功能的调控及其研究进展（论文提纲范文）
| 1 pygo是Wnt信号途径的新成员 |
| 2 pygo对心脏发育具有调控作用 |
| 3 pygo调控成体心脏生理功能和心脏衰老 |
| 4 pygo在成体心脏中的功能独立于经典Wnt信号 |
| 4.1 pygo在成体心脏功能中的调控可能依赖于TCF类似因子 |
| 4.2 pygo可能直接越过lgs调控TCF靶基因而独立于经典Wnt信号 |
| 5 pygo基因调控心脏功能的分子机制探讨 |
| 5.1 pygo依赖Wnt信号的分子机制 |
| 5.2 pygo独立于Wnt信号的分子机制 |
| 5.3 pygo与表观遗传学修饰相关,扮演染色质阅读器的作用 |
| 6 结语 |
（7）果蝇心脏发育候选基因Nulp1的相互作用蛋白研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1. 引言和文献综述 |
| 1.1 心脏发育相关基因 |
| 1.2 模式动物果蝇与心脏发育研究 |
| 1.3 WNT信号通路 |
| 1.4 FHL2 |
| 1.5 人类NULP1基因及研究意义 |
| 2. 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3. 实验结果及其分析 |
| 3.1 果蝇NULP1基因生物信息学分析 |
| 3.2 果蝇NULP1与FHL2以及ARM三个基因相互作用关系分析 |
| 3.3 果蝇NULP1与FHL2以及ARM三个基因亚细胞共定位分析 |
| 4. 试验结果的讨论 |
| 5. 其他实验工作 |
| 5.1 果蝇NULP1抗体的制备以及检测 |
| 5.2 斑马鱼LEFTY2多克隆抗体的制备 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 后记 |
（8）Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 引言和文献综述 |
| 第一节 果蝇心脏发育 |
| 一、果蝇心脏结构与发育的胚胎学 |
| 二、果蝇心脏发育的基因调控 |
| 第二节 利用果蝇模型研究脊椎动物心脏发育信号调控 |
| 第三节 转基因果蝇模型的建立 |
| 第四节 Yippee基因及其与心脏发育的潜在功能推测 |
| 第五节 课题研究意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 第一节 材料 |
| 第二节 方法 |
| 一、Yippee基因的获得 |
| 二、转基因果蝇载体pUAS-Yippee-IRES-GFP的构建、检测及质粒大提 |
| 三、果蝇胚胎显微注射 |
| 四、转基因果蝇的筛选、平衡、定位以及PCR验证 |
| 五、果蝇品系的杂交及杂交后代的观察 |
| 第三章 结果与分析 |
| 一、Yippee的全长cDNA、编码区及其编码蛋白的分析 |
| 二、Yippee蛋白与其他物种同源蛋白的同源性比较及进化保守性分析 |
| 三、pUAS-Yippee-IRES-GFP质粒构建的结果与分析 |
| 四、胚胎显微注射结果及P转座子插入位点平衡定位分析 |
| 五、转基因果蝇的PCR验证及其结果与分析 |
| 六、果蝇品系的杂交及杂交后代观察的结果与分析 |
| 第四章 讨论 |
| 一、实验方法 |
| 二、Yippee基因对果蝇心脏发育和果蝇淋巴腺发育的影响及其潜在的功能 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）心脏发育过程中的信号调控机制研究（论文提纲范文）
| 1 前言 |
| 2 心脏发育过程中的信号调控机制研究现状 |
| 2.1 心脏发育调控机制的研究策略和研究手段的现状 |
| 2.1.1 从比较发育生物学中得出结论和寻找有益的信息 |
| 2.1.2 确定和追踪心脏细胞发育及参与的信号分子 |
| 2.1.3 利用模式动物进行遗传学分析 |
| 2.1.4 生物化学和分子生物学研究 |
| 2.2 心脏发育过程中信号调控机制研究的现状 |
| 2.2.1 小鼠心脏发育中的信号传导调控机制研究 |
| 2.2.1.1 心脏的诱导及生心细胞的特化 |
| 2.2.1.2 心管形成 |
| 2.2.1.3 心脏环化和不对称发育 |
| 2.2.1.4 腔室特化和生长 |
| 3 心脏发育和血管发生的信号调控机制研究的发展趋势 |
| 3.1 信号传导通路与核心转录调控网络关系的建立 |
| 3.2 新的信号传导途径的发现 |
| 3.3 信号通路研究的精细化与量化 |
| 3.4 系统生物学的研究方法 |
| 4 结语 |
（10）利用模式生物果蝇研究人类心脏发育的基因调控（论文提纲范文）
| 一、模式生物果蝇是进行基因功能研究的理想动物模型 |
| 1. 独特的P因子插入诱变法, 可以大规模诱发单基因突变 |
| 2.致死基因可以通过稳定遗传的隐性致死平衡系来保存 |
| 3. UAS-GaL4二元转基因果蝇系统和RNAi等新技术的建立为果蝇基因调控途径的研究提供了捷径 |
| 二、果蝇与人类心脏早期发育的进化保守性 |
| 三、果蝇模型与人类心脏发育基因及其基因调控的相似性 |
| 四、利用果蝇模型研究人体心脏发育的基因调控的基本思路 |
| 1.高通量筛选和鉴定控制果蝇心脏发育的候选基因 |
| 2.利用果蝇模型筛选和鉴定人类心脏早期发育的候选基因 |
| 3.利用果蝇模型进行基因功能与调控途径的研究 |
四、果蝇心脏发育基因调控的研究进展（论文参考文献）
- [1]BmSlit和受体BmRobo以及BmTbx20在家蚕丝腺中的表达研究[D]. 王芹. 山东农业大学, 2020(01)
- [2]基于OCT技术的生物体心脏生理特性分析及微血管造影成像[D]. 谭昊. 河北大学, 2020(08)
- [3]Akirin基因调控鸭成肌细胞增殖与分化的作用研究[D]. 孙文强. 四川农业大学, 2019(07)
- [4]AnxB9基因敲减联合规律运动对增龄果蝇心脏功能的影响[D]. 张民. 湖南师范大学, 2017
- [5]果蝇TSMR1对心脏发育基因启动子活性的影响[D]. 颜尔聪. 湖南师范大学, 2017(04)
- [6]pygo基因对心脏功能的调控及其研究进展[J]. 朱莎莎,吴秀山,袁婺洲. 生命科学研究, 2016(01)
- [7]果蝇心脏发育候选基因Nulp1的相互作用蛋白研究[D]. 龚琳. 湖南师范大学, 2011(08)
- [8]Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究[D]. 彭忠禄. 湖南师范大学, 2008(05)
- [9]心脏发育过程中的信号调控机制研究[J]. 常在,杨中州. 生命科学, 2007(04)
- [10]利用模式生物果蝇研究人类心脏发育的基因调控[J]. 吴秀山. 科技导报, 2004(02)