一、攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究（论文文献综述）
王云[1]（2018）在《酒酒球菌细胞个体发育过程中三种新的结构现象研究》文中提出酒酒球菌是葡萄酒中苹果酸-乳酸发酵（Malolactic fermentation,MLF）的主要启动者和完成者。目前乳酸菌（Lactic acid bacteria,LAB）研究已经取得相当大的进展,但是其胁迫机制和细菌Oenococcus oeni（O.oeni）的应用仍具挑战性。在对中国北方取样的O.oeni进行检测后,我们确定了这种细菌在细胞的个体发育过程中的三种从未报道过的结构现象。得益于实验方法的改进,发现在菌体生长过程中同时发生了芽殖和二分裂（Budding and Binary Fission,BBF）;我们观察到一种新的细胞结构,石榴状结构（Pomegranate-shaped structure,PSS）,其主要发生在稳定期后期和衰亡期;证明了共生和循环现象（Symbiosis and cyclical phenomena,SCP）在细胞的不同生长期是存在的。这些实验观察结果提供了证实和完成细菌细胞生长过程的令人信服的证据。特别地,鉴定了揭示细胞生长的复杂过程的新结构。这些发现将有助于进一步理解O.oeni的生长和发育过程,并为该乳酸菌的复杂生长周期提供新的视角。BBF,PSS与SCP构成了对菌体的个体发育的特异性和普遍性的完整认识。本研究主要获得如下结果:（1）研究发现酒酒球菌个体发育过程中三种新的细胞结构现象。同时,SCP现象最为显着,大小不同的各个生长期的试验菌株存在着共生现象（SCP）,SCP的组成及其活动的规律是一个非常复杂的相互作用的生命现象。这可能也是为什么O.oeni在分类学上不断地变化的原因。（2）揭示了试验菌株在生长过程同时存在二分裂和芽殖（BBF）不是偶然的、孤立的现象,相信,BBF的发生和环境对细胞的影响有一定关系,或者说,是细胞对特定的微环境变化作出的反应。（3）探明了试验菌株在不同的生长时期上主要有球状、链状和石榴状结构（PSS）的变化,PSS的结构发现揭示了细胞生长过程中可能存在着一种新的复杂的细胞形态。（4）探讨了影响这些现象以及促进和抑制细胞个体发育的生态因子,从而加深我们对这些现象的形成、演变的详细过程及其机制的认识。（5）评估并完善了FESEM和TEM样品制备方法,快速、大批量地进行样品制备。
王坐京[2]（2009）在《酒酒球菌抗酒精连锁基因RAPD特异性标记的研究》文中进行了进一步梳理本研究以从宁夏银川广夏葡萄酿酒有限公司分离筛选鉴定出的28株酒酒球菌和葡萄酒学院保藏的23株优良酒酒球菌为试材,构建适合酒酒球菌的RAPD-PCR反应体系,采用分离群体分析法（Bulked segregant Analysis,BSA）,对酒酒球菌抗酒精连锁基因进行了RAPD标记,为目的基因克隆以及筛选抗酒精菌株提供理论依据。主要研究结果如下:1.经本实验研究分析,优良酒酒球菌的抗酒精能力应在12%（体积分数）以上。2.从28株供试菌株中筛选出不抗酒精的8株菌株,编号为NX-1a、NX-2b、NX-1c、NX-3e、NX-3f、NX-1g、NX-2g、NX-1h。其余20株对酒精都有良好的抗性。3.通过对TaqE、Mg2+、dNTP、模板DNA、Primer不同浓度的优化试验以及对PCR反应程序的筛选,建立了适合本实验的RAPD-PCR扩增体系,具体为1.0UTaq酶、160μmol/L dNTP、0.4μmol/L随机引物、3.0mmol/LMg2+、10ng的DNA模板。扩增程序为:94℃变性300S,一个循环;94℃变性60S;36℃退火60S;72℃延伸90S,45个循环;72℃延伸300S,一个循环。4.选取耐酒精及酒精敏感菌株各5株,分别将其DNA等量混合建立抗酒精基因池和酒精敏性基因池,依据BSA法,通过RAPD实验,从45个10碱基随机引物中筛选出了一个在两池间扩增出差异条带的引物S90。在单菌株DNA中进行RAPD实验,证明了该引物扩增出的特异性片段S90-750是一个与酒酒球菌抗酒精基因相连锁的RAPD标记。本实验为进一步开展酒酒球菌抗酒精分子标记辅助选择及抗酒精基因的克隆和定位奠定了基础。
周利国[3]（2009）在《宁夏银川葡萄酒产区酒酒球菌分离筛选及鉴定》文中进行了进一步梳理葡萄酒发达国家如法国、美国、意大利、南非以及葡萄牙等国都通过对酒酒球菌的分离,筛选出酿酒适应性和酿酒特性优良的菌株,并实现商业化,向生产中推广。我国地域广阔,生态条件复杂,生产实践表明,在葡萄酒产区存在着优良的自然菌株,但由于分离筛选较为困难和对优良菌种在生产上的重要性的重视程度不够,使我国苹果酸-乳酸菌资源的研究与利用至今仍是空白。因此,对我国葡萄酒主产区苹果酸-乳酸菌尤其是酒酒球菌资源进行开发与利用,从中筛选出适合我国葡萄酒生产的乳酸菌株,对促进我国葡萄酒行业发展具有重要的意义。本研究选取具有代表宁夏银川地区菌种特性的广夏葡萄酿酒有限公司发酵站进行采集菌种工作。试验采用ATB分离培养基从正在进行苹果酸-乳酸发酵的葡萄酒中分离菌株。酒样的品种分别为:蛇龙珠（Cabernet Gernischet）、梅鹿辄（Merlot）、黑比诺（Pinot Noir）和赤霞珠（Cabernet Sauvignon）。通过本研究得出以下结果:1.采用酒酒球菌分离培养基从葡萄酒中共分离得到30株苹果酸-乳酸细菌,通过对其形态学特征、苹果酸分解实验、过氧化氢酶实验、生理生化实验（碳源产酸、石蕊牛奶实验、西红柿汁生长因子依赖性、低pH抗性和酒精抗性实验等）进行鉴定后表明,分离菌株均为酒球菌属细菌（Oenococcus）。2.通过对分离得到的30株菌株进行酿酒适应性实验,从中筛选出4株酿酒适应性优良的菌株（NX-2a、NX-3g、NX-4b、NX-1e）。利用16S-23S rDNA间隔序列分析对这4株菌株进行分子鉴定。结果表明:供试4株菌株可能的16S-23S间序列的同源性均为100%,可推知这4株菌株可能为同一菌株,均为酒酒球菌（Oenococcus oeni）。3.酿酒葡萄品种的差异也影响着葡萄酒中酒酒球菌的数量。在酒样理化环境相似的情况下,不同品种酒中酒酒球菌的数量有着明显的差异。其中黑比诺和赤霞珠品种酒中细菌数量最少,为105cfu/mL,蛇龙珠和梅鹿辄品种酒中的细菌数量相对较多,达到了107cfu/mL。4.对分离菌株的酿酒适应性（pH、酒精和SO2的抗性）的系统研究表明:不同菌株间的酿酒适应性存在着很大的差异。随着环境酒精、酸、SO2含量的升高,菌株的生长量逐渐减小。其中,NX-3g比对照菌株SD-2a的适应性更强。此外,NX-2a、NX-4b、NX-1e也有较强的酿酒适应性。通过本试验,优选出的4株菌株经过形态学特征、生理生化鉴定和分子鉴定,均为酒酒球菌（Oenococcus oeni）。
夏双梅[4]（2004）在《苹果酸-乳酸酶高活性菌株的筛选及酿造学特性研究》文中进行了进一步梳理本研究在课题组前期构建的菌株分离筛选体系基础上，重点对我国宁夏葡萄酒主产区葡萄酒自然优良变异的苹果酸-乳酸菌进行筛选和利用。通过筛选酿造学特性优良、具有高苹果酸-乳酸酶活性的菌株，并对分离株进行了系统鉴定，以期为生产提供优良的发酵菌株。通过研究得出以下结论：1．在2002、2003两个葡萄年份对我国宁夏葡萄酒主产区的苹果酸-乳酸菌进行了分离和筛选。通过考查分离菌株苹果酸-乳酸发酵性能、发酵适应性及发酵特性后，对鉴定为酒类酒球菌的12株菌株进行了pH、SO2和酒精等因素耐受性试验，然后再选择抗性较好的初选菌株进行苹果酸-乳酸酶活力测试。结果表明，分离菌株N7-03具有较强的苹果酸-乳酸酶活力[117.05mg苹果酸/log（cfu/ml）]，进一步的研究表明，N7-03具有良好的酿造学适应性。2．通过对N7-03个体形态特征和菌落形态特征观察和Gram染色、过氧化氢酶反应、生理生化特性及苹果酸-乳酸酶基因（mle）的测序等鉴定指标分析表明，分离菌株N7-03为酒类酒球菌（O.oeni N7-03）。3．利用PCR方法从酒类酒球菌N7-03基因组中扩增出651 bp的DNA片段，将之克隆到pUC19-T载体上并转化大肠杆菌（E. coli）JM109菌株。重组质粒的测序结果表明，克隆到了苹果酸-乳酸酶基因（mle），它含有527bp 的阅读框架，其核苷酸序列与国外文献报道相同。 4．采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）研究了N7-03进行苹果酸-乳酸发酵对赤霞珠干红葡萄酒风味影响。结果表明葡萄酒苹果酸-乳酸发酵前后风味成分主要包括有机酸类、酯类、酚类、杂环类以及高级饱和或不脂肪酸、呋喃羧酸、挥发性酚、吲哚醇和香荚兰醇等。其中，2-甲基-1-丙醇、乙酸乙酯、3-甲基-1-丙醇、2,3-丁二醇、2-羟基丙酸乙酯、苯乙醇、丁二酸二乙酯、乙基-氢化琥珀酸和4-羟基苯甲醇等成分构成了葡萄酒的主体香气，这些主体香气与其他风味成分一起构成葡萄酒的典型风味特征。苹果酸-乳酸发酵只对葡萄酒的风味具有修饰作用。商业发酵剂与N7-03在苹果酸-乳酸发酵后的主体风味物质的种类与含量变化不大，仅在微量成分上存在细微差异，苹果酸-乳酸发酵后，葡萄酒风味特征极为相似。这也表明，N7-03是一株发酵风味特性优良的菌株，具有良好的商业应用潜力。
王西锐[5]（2002）在《葡萄酒CO2浸渍发酵法的研究》文中认为本文采用CO2浸渍发酵法与传统发酵法，以及酒精发酵后进行苹果酸—乳酸发酵与不进行苹果酸-乳酸发酵对比的方法，从总酸、苹果酸、pH值、色素、丹宁、总酚及口感变化几个方面，研究了CO2浸渍发酵法对中国葡萄属野生种毛（黑）葡萄、山葡萄及原料质量较差的欧洲种赤霞珠葡萄酒品质的影响，对利用CO2浸渍发酵法提高有缺陷原料葡萄酒品质的可能性进行了探讨。 结果表明：与传统发酵法相比，CO2浸渍发酵法明显降低葡萄酒总酸及苹果酸含量，pH值显着上升，酚类、色素浸出减少；经CO2浸渍发酵后，酒体酸度降低，口感变得柔和，协调性增加，口感质量与对照相比得到明显改善。结果还表明，CO2浸渍发酵结束后，再继续进行苹果酸-乳酸发酵，葡萄酒口感质量可以得到进一步改善。野生葡萄经传统酒精发酵唐继续进行苹果酸-乳酸发酵,口感质量提高,但苹果酸-乳酸发酵进程缓慢。CO2浸渍发酵能促进苹果酸-乳酸发酵。 感官品评结果表明，野生毛（黑）葡萄、山葡萄经CO2浸渍发酵法酿制的葡萄酒协调性好，有花、果香气；对照酒口感酸涩，生青味突出。CO2浸渍发酵法酿制的赤霞珠葡萄酒口感柔和，香气纯正。 通过分析，认为CO2浸渍发酵工艺适宜于含酸量高、含糖量低的野主葡萄酿酒；CO2浸渍发酵法可以提高有缺陷原料的葡萄酒的质量。 CO2浸渍发酵法酿制野生葡萄酒的工艺为：
张春晖[6]（2001）在《中国优良酒类酒球菌（Oenococcus oeni）的分离筛选及苹果酸—乳酸发酵研究》文中指出本文通过对酒类酒球菌分离培养条件的选择，建立了酒类酒球菌的分离培养体系，并对我国葡萄酒主产区的苹果酸—乳酸菌进行分离和鉴定，从中筛选出了酿酒适应性和酿酒特性优良的菌株。本文同时还对葡萄酒苹果酸—乳酸发酵过程中环境条件对细菌生长的影响、葡萄糖/苹果酸代谢规律以及能量代谢等方面的内容进行了研究，结果表明： 1．在ATB、MRS、Rogos等10种培养基中，ATB和改良MRS培养基的RDF值（相对鉴别力）最高，放线菌酮和山梨酸均能抑制酵母菌的生长，万古霉素能够抑制乳杆菌属细菌的生长。酒类酒球菌的分离培养基配方为：ATB培养基+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素或MRS培养基+10％番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素，25～30℃厌氧（N2）培养； 2．采用酒类酒球菌分离培养基从我国不同生态带葡萄酒产区的葡萄酒中分离得到24株苹果酸—乳酸菌。通过对其培养特征、形态学特征、苹果酸分解实验、过氧化氢酶实验、生理生化鉴定（碳源产酸、石蕊牛奶实验、番茄汁生长因子依赖性、低pH抗性和酒精抗性实验等）进行考查后表明，分离菌株均为酒球菌属细菌（酒类酒球菌）。 3．采用全细胞可溶性蛋白电泳技术与随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对分离菌株进行区分，结果表明，全细胞可溶性蛋白电泳图谱可以进行苹果酸—乳酸细菌的种间区分，但不能用于酒类酒球菌菌株间的区分；RAPD图谱可以较好的用于酒类酒球菌菌株间的区分； 4．通过对酒类酒球菌11个随机引物共113个条带的相似性进行UPGMA聚类分析表明，从我国不同生态区来源的酒类酒球菌可以分为两个亚群，这与前人的研究结果相似； 5．对分离菌株的酿酒适应性（对低pH、酒精含量和SO2的抗性）进行了系统研究，结果表明，不同菌株间的酿酒适应性存在着很大的差异。其中，O.oeni SD-2a比商业菌株O.oeni 31DH的适应性更强，此外，O.oeni SD-1b、O.oeni SD-2i和O.oeni SD-2h也有较好的酿酒适应性； 6．对优选菌株的酿酒特性进行了考查，结果表明，不同菌株间的苹果酸—乳酸酶活力也存在着较大的差异，其中O.oeni SD-2h和O.oeni SD-2a，具有较高的MLA； 7．考查4株优选细菌对葡萄酒苹果酸—乳酸发酵前后游离氨基酸含量变化的结果表明，苹果酸—乳酸发酵后，酒中总的游离氨基酸含量上升，其中Ser， Glu，Lys和Arg含量的升幅较大； 8．对苹果酸—乳酸发酵过程中苹果酸/葡萄糖代谢规律进行了研究发现，苹果酸/葡萄糖共存时，细菌对两者的代谢受pH的调控，低pH值（3.2-3.5）条件下，细菌优先分解苹果酸，随着pH值的升高，细菌对葡萄糖的分解速度加快，进一步研究表明，低pH值（3.2-3.5）条件下，细菌的糖代谢活动受到抑制，此时，细菌主要通过分解苹果酸获取能量的，这也证明酒类酒球菌进行苹果酸—乳酸发酵的目的性是为了在胁迫条件下获取能量，而不是为了提高生活环境的pH值。 9．采用荧光素-荧光素酶法对苹果酸—乳酸发酵过程中的ATP产生情况进行了分析，结果表明，酒类酒球菌代谢苹果酸产生ATP受ATPase抑制剂和离子通道剂的抑制，这表明细菌利用苹 2 中国优良洒类酒球自（enococon cent）的分离筛边及苹果酸．乳酸发卜研究 摘要 果酸代谢产生能量时需要维持跨膜质于梯度（凸pH），并需要ATPase的参与。因此细菌是利用化 学渗透机制利用苹果酸产生能量的。 通过对分离菌株酿酒适应性和酿酒特性的综合评价，O cent SryZa是比商业菌株 O cent 31 DH更加优良的囱株．
张春晖,张军翔,胥哲明,闫绍辉[7]（2000）在《攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究》文中研究表明对攀枝花地区苹果酸－乳酸菌酿酒特性初步研究的结果表明，该地方菌种在较低温度（18℃）及PH值（3.11）条件下可以顺利启动完成苹果酸－乳酸发酵（MLF）并获得较好的酒质，但该菌种对SO2十分敏感，当游离SO2浓度达5mg/L时，MLF不能启动。
二、攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究（论文提纲范文）
（1）酒酒球菌细胞个体发育过程中三种新的结构现象研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 文献综述—葡萄酒酒酒球菌研究进展 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 酒酒球菌特性的研究 |
| 1.2.1 酒酒球菌的分离筛选和鉴定 |
| 1.2.2 酒酒球菌酿酒特性 |
| 1.2.3 酒酒球菌的影响因素 |
| 1.3 酒酒球菌胁迫适应性的机理研究 |
| 1.3.1 乙醇胁迫对O.oeniSD-2a接种存活率、冻干存活率、膜脂肪酸组分及质膜H~+-ATPase的影响 |
| 1.3.2 不同培养基对酒酒球菌SD-2a接种存活率、冻干存活率、膜脂肪酸组分及质膜H~+-ATPase的影响 |
| 1.3.3 酸胁迫对O.oeniSD-2a接种存活率、冻干存活率、膜脂肪酸组分及质膜H~+-ATPase的影响 |
| 1.3.4 温度胁迫对O.oeniSD-2a质膜H~+-ATPase的影响 |
| 1.3.5 酒酒球菌抗冷冻干燥机制 |
| 1.3.6 酒酒球菌细胞膜脂肪酸成分检测方法 |
| 1.4 酒类酒球菌应用的研究 |
| 1.4.1 固定化酒类酒球菌及其酿酒特性的研究 |
| 1.4.2 苹果酸乳酸发酵助剂的研究 |
| 1.4.3 葡萄酒降酸酵母的研究 |
| 1.4.4 酒酒球菌冻干粉的研制 |
| 1.5 酒酒球菌代谢安全性研究 |
| 1.5.1 精氨酸代谢产生氨基甲酸乙酯 |
| 1.5.2 氨基酸代谢产生生物胺(BiogenicAmines,BAs) |
| 1.6 微生物生长过程的细胞分裂 |
| 1.6.1 裂殖与微生物 |
| 1.6.2 芽殖与微生物 |
| 1.7 酒酒球菌未来研究方向 |
| 1.8 研究的目的、意义及研究的主要内容 |
| 1.8.1 研究的主要目的和意义 |
| 1.8.2 研究的主要内容 |
| 1.8.3 技术路线图 |
| 第二章 试验材料的筛选制备及其显微结构特性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 菌体细胞显微结构特性 |
| 2.2.1 材料与仪器 |
| 2.2.1.1 菌株 |
| 2.2.1.2 培养基 |
| 2.2.2 培养条件 |
| 2.2.3 样品的培养及采集 |
| 2.2.4 仪器与设备 |
| 2.2.5 样品染色 |
| 2.2.6 讨论与小结 |
| 2.3 菌体细胞及细胞结构分析指标和方法的建立 |
| 2.3.1 材料与方法 |
| 2.3.2 分析指标 |
| 2.3.3 结果及分析 |
| 2.3.4 讨论与小结 |
| 第三章 芽殖和裂殖并存现象的初步研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.1.1 裂殖与微生物 |
| 3.1.2 芽殖与微生物 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试验菌株 |
| 3.2.2 培养基 |
| 3.2.3 培养条件 |
| 3.2.4 样品培养与采集 |
| 3.2.5 仪器与设备 |
| 3.2.6 分析方法 |
| 3.2.7 数据处理 |
| 3.3 分析指标 |
| 3.3.1 形态特征 |
| 3.3.2 结构特征 |
| 3.3.3 时间性特征 |
| 3.3.4 空间性特征 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 BBF 1 |
| 3.4.2 BBF 2 |
| 3.4.3 BBF 3 |
| 3.5 讨论与小结 |
| 第四章 石榴状结构的分析和推测 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试验菌株 |
| 4.2.2 培养基 |
| 4.2.3 培养条件 |
| 4.2.4 样品培养与采集 |
| 4.2.5 仪器与设备 |
| 4.2.6 分析方法 |
| 4.2.7 数据处理 |
| 4.3 分析指标 |
| 4.3.1 形态特征 |
| 4.3.2 结构特征 |
| 4.3.3 时间性特征 |
| 4.3.4 空间性特征 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 PSS内部结构的变化 |
| 4.4.2 细胞和细胞簇 |
| 4.4.3 PSS外部的膜的变化及其影响 |
| 4.5 讨论与小结 |
| 第五章 共生和循环现象的初步研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试验菌株 |
| 5.2.2 培养基 |
| 5.2.3 培养条件 |
| 5.2.4 样品培养与采集 |
| 5.2.5 仪器与设备 |
| 5.2.6 分析方法 |
| 5.2.7 数据处理 |
| 5.3 分析指标 |
| 5.3.1 形态特征 |
| 5.3.2 结构特征 |
| 5.3.3 时间性特征 |
| 5.3.4 空间性特征 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.5 讨论与小结 |
| 第六章 菌体新的细胞结构的影响因素的研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.1.1 16SrDNA序列同源性分析 |
| 6.1.2 16S～23SrDNA间隔序列分析 |
| 6.1.3 环境因素酒类酒球菌生长的影晌 |
| 6.2 试验菌株的生物学分析(16SrDNA) |
| 6.2.1 检测项目 |
| 6.2.2 检测方法 |
| 6.2.3 结果与分析 |
| 6.3 菌体新细胞结构的影响因素的研究 |
| 6.3.1 材料与方法 |
| 6.3.2 结果与分析 |
| 6.3.3 讨论 |
| 6.4 菌体新细胞结构影响因素的验证试验 |
| 6.4.1 材料与方法 |
| 6.4.2 分析指标 |
| 6.4.3 结果与分析 |
| 6.4.4 讨论与小结 |
| 第七章 结论、展望与创新点 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 展望 |
| 7.3 创新点 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）酒酒球菌抗酒精连锁基因RAPD特异性标记的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 苹果酸-乳酸发酵的酿造学意义 |
| 1.2.1 降酸作用 |
| 1.2.2 增加细菌学稳定性 |
| 1.2.3 风味修饰 |
| 1.2.4 降低色度 |
| 1.3 影响苹果酸-乳酸发酵的环境因子 |
| 1.3.1 发酵温度的影响 |
| 1.3.2 营养条件影响 |
| 1.3.3 酒精浓度的影响 |
| 1.3.4 二氧化硫浓度的影响 |
| 1.3.5 有机酸含量的影响 |
| 1.3.6 通气的影响 |
| 1.4 引起苹果酸-乳酸发酵的乳酸菌种类 |
| 1.4.1 酒球菌属的建立 |
| 1.4.2 酒酒球菌特征 |
| 1.4.3 影响乳酸菌在葡萄酒中生长的因素 |
| 1.5 分子标记概述 |
| 1.5.1 RFLP 标记 |
| 1.5.2 RAPD 标记 |
| 1.5.3 AFLP 标记 |
| 1.5.4 RAPD 标记的优越性 |
| 1.6 国内外研究进展 |
| 1.7 本研究目的意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌株 |
| 2.1.2 培养基 |
| 2.1.3 试剂 |
| 2.1.4 仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 抗酒精菌株与酒精敏性菌株的筛选 |
| 2.2.2 基因组DNA 的提取 |
| 2.2.3 酒酒球菌基因组DNA 纯度的检测 |
| 2.2.4 抗性、敏性基因池的构建 |
| 2.2.5 RAPD 反应体系的优化 |
| 2.2.6 随机多态性引物的筛选和抗酒精基因RAPD 标记 |
| 2.2.7 在单菌株中进一步验证 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 抗酒精菌株与酒精敏性菌株的筛选 |
| 3.2 基因组DNA 纯度的检测分析 |
| 3.3 RAPD 反应体系的优化 |
| 3.4 随机引物的筛选 |
| 3.5 抗酒精基因的标记 |
| 3.6 S90 对其余菌种扩增结果 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 关于酒酒球菌酒精抗性的评价 |
| 4.2 CTAB 法提取基因组DNA 和抗酒精、酒精敏性基因池的构建 |
| 4.3 RAPD 结果的稳定性的问题 |
| 4.4 关于酒酒球菌抗酒精基因RAPD 的标记 |
| 4.5 对筛选到的酒酒球菌抗酒精基因分子标记进行深入研究设想 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）宁夏银川葡萄酒产区酒酒球菌分离筛选及鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果酸-乳酸发酵与葡萄酒的降酸 |
| 1.2 苹果酸-乳酸发酵对酒质的影响 |
| 1.2.1 苹果酸-乳酸发酵的作用 |
| 1.2.2 苹果酸-乳酸发酵过程中葡萄酒成分的变化 |
| 1.3 葡萄酒LAB 主要种、属 |
| 1.3.1 葡萄酒LAB 的种类 |
| 1.3.2 酒球菌属的特征 |
| 1.4 葡萄酒乳酸菌的分离 |
| 1.4.1 苹果酸-乳酸菌的分离 |
| 1.4.2 酒酒球菌的分离 |
| 1.5 影响LAB 在葡萄酒中生存与生长的因素 |
| 1.5.1 葡萄酒的理化特性与组成 |
| 1.5.2 酿造工艺的影响 |
| 1.5.3 微生物间的相互关系 |
| 1.6 分子生物学方法在葡萄酒LAB 分类鉴定中的应用 |
| 1.6.1 16S rRNA 序列分析 |
| 1.6.2 16S-23S rRNA 间隔序列分析 |
| 1.6.3 随机扩增多态性DNA 检测和(或)AP-PCR |
| 1.6.4 探针杂交技术及DNA 芯片技术 |
| 1.6.5 扩增性DNA 限制性酶切片段分析方法 |
| 1.6.6 多重PCR(Multiplex PCR)技术 |
| 1.6.7 变性梯度凝胶电泳或温度梯度凝胶电泳技术 |
| 1.7 选题的目的和意义 |
| 第二章 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 菌株 |
| 2.1.2 培养基 |
| 2.1.3 主要试剂及来源 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 菌株的分离方法 |
| 2.2.2 不同品种酒细菌数量的统计 |
| 2.2.3 苹果酸分解实验 |
| 2.2.4 菌种的鉴定 |
| 2.2.5 菌株对pH、SO_2、酒精的抗性实验 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 酒酒球菌的分离 |
| 3.1.1 酒样的理化指标 |
| 3.1.2 酒酒球菌的分离 |
| 3.2 不同品种酒细菌数量 |
| 3.3 初筛菌株的多相鉴定 |
| 3.3.1 初筛菌株的形态学鉴定 |
| 3.3.2 苹果酸分解实验 |
| 3.3.3 革兰氏染色 |
| 3.3.4 过氧化氢酶实验 |
| 3.3.5 生理生化鉴定 |
| 3.3.6 菌株鉴定特征描述 |
| 3.4 部分菌株的分子生物学鉴定 |
| 3.4.1 凝胶电泳检测结果 |
| 3.4.2 16S-23S rDNA 测序比对 |
| 3.5 菌株对pH、SO_2、酒精的酿酒适应性实验 |
| 3.5.1 菌株对酒精的抗性 |
| 3.5.2 菌株对pH 的抗性 |
| 3.5.3 菌株对SO_2 的抗性 |
| 3.5.4 菌株对酒精、pH、SO_2 的复合因子的抗性 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 优良苹果酸-乳酸菌的筛选标准 |
| 4.2 酒酒球菌的传统方法鉴定 |
| 4.3 16S-23S 间隔序列在酒酒球菌鉴定中的应用 |
| 4.4 菌株的酿酒适应性实验 |
| 4.5 葡萄品种对酒酒球菌数量的影响 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 发表论文情况 |
（4）苹果酸-乳酸酶高活性菌株的筛选及酿造学特性研究（论文提纲范文）
| 第一部分 文献综述 |
| 1 苹果酸-乳酸发酵酿造学意义 |
| 2 苹果酸-乳酸菌对葡萄酒中有机酸的代谢 |
| 3 葡萄酒乳酸菌的分离 |
| 4 优良酒类酒球菌的筛选标准 |
| 5 苹果酸-乳酸发酵研究进展 |
| 6 本研究的目的与意义 |
| 第二部分 材料与方法 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 酒样 |
| 1.3 培养基及菌株分离 |
| 1.4 苹果酸-乳酸发酵分析方法 |
| 1.5 菌种鉴定 |
| 1.6 mle测序 |
| 1.7 葡萄酒风味的气相色谱-质谱(GC-MS)分析 |
| 第三部分 结果与分析 |
| 1 苹果酸-乳酸菌分离与筛选 |
| 1.1 苹果酸-乳酸菌的分离 |
| 1.2 苹果酸-乳酸发酵试验 |
| 1.3 分离菌株对pH、酒精和SO2耐受性的研究 |
| 1.4 初选菌株在葡萄酒中苹果酸-乳酸发酵实验 |
| 2 优选菌株苹果酸-乳酸酶活性的测定 |
| 3 分离菌株N7-03的鉴定 |
| 3.1 N7-03形态学特征 |
| 3.2 生理生化特征 |
| 4 N7-03苹果酸-乳酸酶活力基因的克隆 |
| 4.1 酒类酒球菌基因组DNA的提取 |
| 4.2 mle的扩增 |
| 4.3 基因与载体的连接、转化及鉴定 |
| 4.4 重组质粒的测序 |
| 5 N7-03进行苹果酸-乳酸发酵对干红葡萄酒香气的影响 |
| 第四部分 讨 论 |
| 1 优良苹果酸-乳酸菌的筛选 |
| 2 苹果酸-乳酸发酵与其他降酸方法的比较 |
| 3 酒类酒球菌苹果酸-乳酸酶活力与mle |
| 4 香气成分的GC/MS分析及其与感官分析的关系 |
| 第五部分 结 论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（5）葡萄酒CO2浸渍发酵法的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 葡萄酒工艺研究进展 |
| 1.1 酒精发酵研究现状 |
| 1.1.1 原料的成熟度控制与改良 |
| 1.1.2 浸渍 |
| 1.1.3 葡萄酒酵母菌的研究 |
| 1.1.3.1 葡萄酒酵母菌的作用 |
| 1.1.3.2 酿酒酵母胞壁大分子对酒质的影响 |
| 1.1.3.3 酿酒酵母对葡萄酒中氨基酸含量的影响 |
| 1.1.3.4 转基因葡萄酒酵母的应用 |
| 1.2 苹果酸-乳酸发酵研究 |
| 1.2.1 MLF对酒质的影响 |
| 1.2.1.1 降酸作用 |
| 1.2.1.2 增加细菌学稳定性 |
| 1.2.1.3 风味修饰 |
| 1.2.1.4 乳酸细菌可能引起的葡萄酒病害 |
| 1.2.2 MLF生化反应机理 |
| 1.2.3 影响MLF的环境因素 |
| 1.2.3.1 酒精 |
| 1.2.3.2 SO_2含量 |
| 1.2.3.3 pH |
| 1.2.3.4 温度 |
| 1.3 CO_2浸渍发酵研究现状 |
| 1.3.1 CO_2浸渍中的葡萄汁及葡萄酒化学成分的变化 |
| 1.3.1.1 有机酸组分的变化 |
| 1.3.1.2 单宁、总酚的变化 |
| 1.3.1.3 香气成份的变化 |
| 1.3.1.4 色素的变化 |
| 1.3.1.5 无机营养成分及功能性成分的变化 |
| 1.3.2 CO_2浸渍中微生物群落的变化 |
| 2. 野生葡萄种质资源及其酿酒利用 |
| 2.1 野生葡萄种质资源研究 |
| 2.1.1 种质资源概况 |
| 2.1.2 野生葡萄研究 |
| 2.1.2.1 抗逆性 |
| 2.1.2.2 经济性状研究 |
| 2.1.2.3 野生葡萄的营养物质 |
| 2.2 野生葡萄利用现状 |
| 2.3 野生葡萄发酵特性研究 |
| 2.3.1 野生葡萄酒汁及酒的多酚 |
| 2.3.2 野生葡萄的色素 |
| 2.3.3 野生葡萄的香气 |
| 2.3.4 野生葡萄的品质 |
| 2.3.5 野生葡萄的酿酒工艺研究 |
| 3. 赤霞珠经济生物学及酿酒特性研究 |
| 3.1 赤霞珠经济生物学特性研究 |
| 3.1.1 生长结果习性 |
| 3.1.2 抗逆性 |
| 3.1.3 赤霞珠栽培研究 |
| 3.2 赤霞珠的酿酒适应性 |
| 4. 研究的目的意义 |
| 第二章 材料和方法 |
| 1. 酿酒原料 |
| 2. 酿酒工艺 |
| 2.1 对照工艺 |
| 2.2 CO_2浸渍工艺 |
| 2.3 苹果酸—乳酸发酵工艺 |
| 3. 分析项目及方法 |
| 4. 时间及分析取样 |
| 第三章 结果与分析 |
| 1. 野生葡萄浸渍发酵期间的成分变化 |
| 1.1 野生葡萄浸渍发酵期间总酸、有机酸及pH值的变化 |
| 1.2 毛葡萄浸渍发酵阶段丹宁、总酚的变化 |
| 1.3 总花色素苷的变化 |
| 1.4 葡萄酒感官质量品评结果 |
| 2. 赤霞珠浸渍发酵期间的成分变化 |
| 2.1 赤霞珠浸渍发酵期间总酸、有机酸及pH值的变化 |
| 2.2 赤霞珠浸渍发酵期间丹宁和总酚的变化 |
| 2.3 赤霞珠浸渍发酵期间总花色素苷的变化 |
| 2.4 赤霞珠葡萄酒感官质量品评结果 |
| 第四章 讨论 |
| 1. 关于总酸的变化 |
| 2. 关于CO_2浸渍的适用性 |
| 3. 关于CO_2浸渍对MLF的影响 |
| 4. 关于感官质量的变化 |
| 5. 关于葡萄酒的香气 |
| 6. 关于CO_2浸渍工艺 |
| 7. 关于色素浸渍与变化 |
| 8. 关于苹果酸的降解 |
| 第七章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）中国优良酒类酒球菌（Oenococcus oeni）的分离筛选及苹果酸—乳酸发酵研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果酸-乳酸发酵与葡萄酒的降酸 |
| 1.2 LAB生态学 |
| 1.3 葡萄酒LAB的分类特征和鉴定 |
| 1.4 葡萄酒LAB主要种、属特征与分类鉴定 |
| 1.5 葡萄酒乳酸菌的分离 |
| 1.6 苹果酸—乳酸发酵对酒质的影响 |
| 1.7 苹果酸-乳酸发酵代谢机理 |
| 1.8 影响LAB在葡萄酒中生存与生长的因素 |
| 1.9 MLF的生产操作 |
| 1.10 现代发酵工程技术的应用 |
| 第二章 实验部分 |
| 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 取样 |
| 2.1.2 培养基 |
| 2.1.3 标准菌株 |
| 2.1.4 实验试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 分离方法 |
| 2.2.2 苹果酸分解实验 |
| 2.2.3 细菌种的鉴定 |
| 2.2.4 细菌的菌株区分 |
| 2.2.5. 细菌生长量的测定 |
| 2.2.6 细菌对pH、SO_2、酒精的抗性实验 |
| 2.2.7 苹果酸乳酸酶活力的测定 |
| 2.2.8 苹果酸—乳酸发酵能量代谢研究方法 |
| 2.2.9 其他测定指标及分析方法 |
| 2.2.10 其他主要试验仪器设备 |
| 结果与分析 |
| 3.1 酒类酒球菌分离培养基的设计 |
| 3.1.1 几种培养基的相对鉴别力比较 |
| 3.1.2 酵母菌的抑制 |
| 3.1.3 乳杆菌属细菌的抑制 |
| 3.1.4 酒类酒球菌的分离培养基的设计 |
| 3.2 酒类酒球菌的分离 |
| 3.2.1 酒样的理化特性 |
| 3.2.2 酒样的酵母菌和霉菌的菌密度 |
| 3.2.3 酒类酒球菌的分离 |
| 3.3 细菌多相鉴定 |
| 3.3.1 培养特征 |
| 3.3.2 形态观察——链状细菌快速染色制片技术 |
| 3.3.3 苹果酸分解实验 |
| 3.3.4 过氧化氢酶反应 |
| 3.3.5 生理生化鉴定 |
| 3.3.6 细菌鉴定特征描述 |
| 3.4 菌株的区分 |
| 3.4.1 全细胞可溶性蛋白电泳 |
| 3.4.2 细菌全细胞可溶性蛋白质电泳图谱分析 |
| 3.4.3 随机扩增多态性DNA与菌株区分 |
| 3.5 酒类酒球菌酿酒适应性研究 |
| 3.5.1 细菌菌密度与OD值的关系 |
| 3.5.2 酒精、pH和SO_2对酒类酒球菌生长的影响 |
| 3.5.3 酒类酒球菌对酒精、pH和SO_2复合因子的抗性 |
| 3.5.4 不同菌株间苹果酸—乳酸酶活力比较 |
| 3.5.5 优选菌株的氨基酸代谢研究 |
| 3.6 苹果酸—乳酸发酵机理研究 |
| 3.6.1 环境因素酒类酒球菌生长的影响 |
| 3.6.2 不同菌株间的生长反应 |
| 3.6.3 苹果酸—乳酸发酵能量产生机制 |
| 讨论 |
| 4.1 MLF的自然引发与人工接种 |
| 4.2 优良酒类酒球菌的筛选标准 |
| 4.3 随机扩增多态性DNA与酒类酒球菌菌株间的区分 |
| 4.4 酒类酒球菌分类学研究进展 |
| 4.4.1 酒明串珠菌种的建立 |
| 4.4.2 酒球菌属的建立 |
| 4.5 酒类酒球菌苹果酸—乳酸酶活力 |
| 4.6 含氮化合物的代谢 |
| 4.7 pH值对苹果酸—乳酸菌糖/苹果酸代谢的影响 |
| 4.8 MLF过程中的能量产生模式 |
| 结论 |
| 英文摘要 |
| 参考文献 |
| 附录 |
四、攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究（论文参考文献）
- [1]酒酒球菌细胞个体发育过程中三种新的结构现象研究[D]. 王云. 西北农林科技大学, 2018(12)
- [2]酒酒球菌抗酒精连锁基因RAPD特异性标记的研究[D]. 王坐京. 西北农林科技大学, 2009(S2)
- [3]宁夏银川葡萄酒产区酒酒球菌分离筛选及鉴定[D]. 周利国. 西北农林科技大学, 2009(S2)
- [4]苹果酸-乳酸酶高活性菌株的筛选及酿造学特性研究[D]. 夏双梅. 西北农林科技大学, 2004(01)
- [5]葡萄酒CO2浸渍发酵法的研究[D]. 王西锐. 西北农林科技大学, 2002(01)
- [6]中国优良酒类酒球菌（Oenococcus oeni）的分离筛选及苹果酸—乳酸发酵研究[D]. 张春晖. 西北农林科技大学, 2001(01)
- [7]攀枝花地区苹果酸-乳酸菌酿酒特性研究[J]. 张春晖,张军翔,胥哲明,闫绍辉. 中外葡萄与葡萄酒, 2000(04)