一、Regulation of activity of nuclear factor-kB and activator protein-1 by nitric oxide, surfactant and glucocorticoids in alveolar macrophages from piglets with acute lung injury（论文文献综述）
陈浪,郇轩,余武汉,李腾飞,肖国辉,张有成[1]（2021）在《炎症反应中巨噬细胞极化机制和中药靶向治疗》文中研究说明巨噬细胞是炎症细胞的重要组成部分,包括促炎M1型和抗炎M2型。两者之间的表型转化决定炎症反应的最终结局。TLR4/NF-κB、MAPK、JAK/STAT、PI3K/AKT和PPAR-γ等是巨噬细胞极化的关键信号通路。在肠、肝、肺、脑等脏器炎性损伤过程中,主要是以M1型巨噬细胞过度活化为主,持续合成、释放炎性因子参与机体的炎性损伤。本文总结了近年来的相关研究,就巨噬细胞极化及其与器官炎性损伤的关系进行阐述,同时探讨中药在调控巨噬细胞极化中的作用,以期为炎症反应性疾病提供新的治疗靶点。
葛林阳,徐双兰,陈子,周林福[2]（2021）在《靶向巨噬细胞免疫球蛋白样凝集素9治疗慢性阻塞性肺疾病的研究进展》文中指出慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）是目前全球唯一病死率呈上升趋势的重大慢性疾病, 药物治疗只能减轻症状和降低急性加重风险, 其发病机制仍未明了, 且缺乏有效的干预药物。唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素9（Siglec-9）主要表达于单核/巨噬细胞、中性粒细胞的抑制性唾液酸聚糖受体, 可调控巨噬细胞极化和气道炎症, 其基因多态性与慢阻肺急性加重表型有关, 靶向巨噬细胞Siglec-9有望成为精准治疗慢阻肺的新途径。
王强,林飞,胡召锟,林锦源,黄冰,潘灵辉[3]（2021）在《MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制》文中研究表明目的探讨Maresin-1（MaR1）治疗脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠的效果和机制。方法将雄性SPF级BALB/c小鼠45只随机分为3组。对照组经口气管插管滴入3 mg/kg生理盐水。LPS组经口气管插管滴入3 mg/kg LPS。MaR1组经口气管插管滴入3 mg/kg LPS,1 h后尾静脉注射1 ng/只MaR1。对比分析3组小鼠肺组织损伤评分、免疫印迹分析小鼠肺组织MAPKs、核因子-κB（NF-κB）蛋白表达,以及氧化应激标记分析3组小鼠肺组织核因子-E2相关因子2（Nrf-2）表达和抗氧化酶的情况。结果与LPS组比较,MaR1组能改善LPS诱导的ALI小鼠肺组织损伤评分（P=0.000）;MaR1组能显着抑制LPS诱导的ALI小鼠MAPKs和p65NF-κB的磷酸化,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）;MaR1组通过上调抗氧化酶增加Nrf-2的核转运,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）;MaR1组抑制了LPS诱导的ALI模型肺组织中活性氧介导的氧化应激反应,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 MaR1治疗小鼠ALI机制可能是通过抑制MAPK和NF-κB的磷酸化,同时活化多种抗氧化酶保护肺组织有关。
徐海博[4]（2021）在《杨梅素对脓毒症相关急性肺损伤保护作用与机制的研究》文中提出
杨盼[5]（2021）在《ROS介导的JNK/c-Jun信号通路在纳米SiO2影响A549细胞SP-A、SP-B表达中的作用研究》文中进行了进一步梳理
郑璐[6]（2021）在《扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究》文中研究指明研究背景:本课题组前期对扶芳藤进行粗提并对其抗炎能力进行初步筛选,结果显示,在体外LPS诱导的RAW264.7细胞实验中,粗提的扶芳藤能够抑制各种炎性因子,具有明显的抗炎活性;在体内二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀实验中,粗提的扶芳藤对小鼠耳肿胀也有一定的抑制作用,表明扶芳藤粗提物体内体外有一定的抗炎作用。本文在前期实验结论的基础上进一步研究扶芳藤粗提物对抗LPS诱导的急性肺损伤活性,并对扶芳藤进行不同极性萃取,深入探寻其抗急性肺损伤的活性成分和作用机制。目的:本课题旨在从体内和体外评价扶芳藤提取物的主要抗炎活性成分对巨噬细胞和A549细胞的影响,并初步探讨扶芳藤主要有效活性单体调控巨噬细胞和A549细胞的潜在作用机制。方法:第一部分中药扶芳藤提取物、主要活性成分以及各萃取物对炎症反应的影响1.建立小鼠急性肺损伤模型测定扶芳藤乙醇提取物高、中、低剂量组对LPS所致小鼠急性肺损伤的影响。2.MTT法检测扶芳藤乙醇提取物以及乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对RAW264.7细胞活力的影响。3.Griess法检测扶芳藤乙醇提取物以及乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO产量的影响。4.ELISA法测定扶芳藤乙醇提取物以及正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌IL-6和TNF-α的影响。5.高效液相色谱法检测正丁醇提取物所含的主要活性成分,以及所含主要活性成分的含量。第二部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞的影响及机制探究1.MTT法检测甜醇对RAW264.7细胞活力的影响。2.Griess法检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO的影响。3.ELISA法测定甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌IL-6和TNF-α的影响4.RT-PCR检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞Myd88、TLR4、TRIF、NF-κB p65、iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达的影响。5.Western-blot检测甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。6.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞NF-κB p65核转位的影响。第三部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的A549细胞的影响及机制探究1.MTT法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞活力的影响。2.Griess法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞分泌NO产量的影响。3.RT-PCR检测甜醇对LPS诱导的A549细胞Myd88、TLR4、TRIF、NF-κB p65、iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达的影响。4.Western-blot检测甜醇对LPS诱导的A549细胞分泌TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。5.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞NF-κB p65核转位的影响。第四部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤中的抗炎作用及其作用机制研究1.ELISA法检测甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响。2.肺湿质量/干质量（W/D）比值检测甜醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤肺组织干湿比的影响。3.BCA及细胞计数法检测甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤BALF中总蛋白浓度和细胞渗出数的影响。4.HE染色检测甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠的肺部组织炎症反应影响。5.Western-blot法检测甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠肺组织细胞中TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。6.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠NF-κB p65核转位的影响。结果:1.中药扶芳藤提取物可显着降低LPS诱导小鼠急性肺损伤肺组织匀浆中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平;可显着降低LPS诱导RAW264.7细胞NO及IL-6的分泌。2.中药扶芳藤中单体甜醇、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物在0～50μmol·L-1浓度下对RAW264.7细胞无明显毒性（P﹤0.05）;甜醇在1～25μmol·L-1时,对A549细胞无明显毒性（P﹤0.05）。因此,RAW264.7细胞选用的浓度为10μmol·L-1、25μmol·L-1和50μmol·L-1;A549细胞选用的浓度为1μmol·L-1、10μmol·L-1和25μmol·L-1。3.扶芳藤乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌的NO、IL-6和TNF-α有显着的抑制作用。4.HPLC表明扶芳藤中甜醇的含量为2.915%,甜醇在乙酸乙酯提取物含量为2.6%,在正丁醇提取物含量为4.6%。在正丁醇提取物中含量最高,与正丁醇提取物抗LPS诱导的急性肺损伤效果最显着相呼应,推测甜醇是主要活性的成分之一。5.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7和A549细胞分泌NO。6.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白的表达。7.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、TRIF、TLR4、Myd88和NF-κB p65的mRNA的表达。8.甜醇抑制LPS诱导的A549细胞iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、TRIF、TLR4、Myd88和NF-κB p65 mRNA的表达;同时,甜醇抑制细胞对TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白的表达。9.扶芳藤中主要活性成分甜醇从病理学角度上明显改善LPS诱导的急性肺损伤小鼠的肺组织的炎性浸润,显着减轻了小鼠肺组织病理状态,改善组织充血的现象,还可以减轻小鼠肺组织渗出物的分泌,肺泡中出血状态减轻,红色变异区域也随之减少,表明小鼠的急性肺损伤状况得到改善,炎症区域普遍缩小,抑制炎症的发生发展,甜醇起到了明显改善小鼠急性肺损伤的作用。结论:1.扶芳藤粗提物高中低剂量在体外实验中,对炎症反应有显着的抑制作用;扶芳藤乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物均对炎症反应有显着的抑制作用,且正丁醇提取物活性最高。2.扶芳藤不同提取物均含有甜醇,且正丁醇提取物中甜醇含量最高,证明甜醇是扶芳藤中主要抗炎活性成分之一。3.甜醇对LPS诱导的RAW264.7和A549细胞的炎症反应有显着的抑制作用。4.甜醇抑制RAW264.7和A549细胞的TLR4-NF-κB p65信号通路。5.扶芳藤中主要活性成分甜醇通过抑制TLR4-NF-κB p65通路发挥抗炎作用,从而对LPS诱导的急性肺损伤小鼠具有保护作用。
石小云[7]（2021）在《M2巨噬细胞在脂多糖诱导肺纤维化中的作用及机制》文中研究表明急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（Acute respiratory distress syndrome,ARDS）,是重症监护病房常见的发病和死亡原因。ALI/ARDS多数由病毒、细菌等微生物引起严重的肺部甚至全身炎症反应。ALI/ARDS的预后通常取决于肺损伤后的结构重塑和纤维化程度,当严重的肺纤维化发生发展时,患者肺功能减退,甚至呼吸衰竭,危及生命。研究认为,在ALI/ARDS炎症消退后肌成纤维细胞的分化是肺纤维化发生的重要环节。肺间质内的Axin2+肌成纤维祖细胞具有分化为肌成纤维细胞的潜能,可能参与肺纤维化的发生发展。外泌体作为细胞间信号传递的重要载体,参与了许多的病理生理过程,还可以作为疾病治疗的靶点,近年来受到非常多的关注。ALI发生后,肺泡灌洗液里发现许多外泌体,特别是巨噬细胞来源的,参与了炎症反应,组织损伤和修复过程。因此,研究M2巨噬细胞外泌体和Axin2+肌成纤维祖细胞之间的关系可能为ALI后肺纤维化的研究和治疗提供新方向和思路。第一部分M2型巨噬细胞在急性肺损伤后的激活以及对AMP增殖活化的影响目的:通过建立急性肺损伤小鼠模型,给予氯膦酸二钠脂质体（Clodronate Liposomes,CL）药物处理消除巨噬细胞后,检测巨噬细胞对急性肺损伤后肺纤维发生的影响,探讨M2巨噬细胞在肺纤维化（Pulmonary fibrosis,PF）中的作用。方法:1.选用无特定病原体（Specific Pathogen Free,SPF）C57BL/6小鼠36只,6-8周龄,体重20-22 g,随机分成2组,实验组腹腔内注射脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）。对照组在腹腔内注射同量的生理盐水。分别于1、3、7天随机处死6只小鼠,PBS灌洗肺泡3次,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar larage fluid,BALF）。流式细胞分析仪检测M1巨噬细胞和M2巨噬细胞的比例。2.建立ALI小鼠模型30只,随机分为2组,ALI+CL组给予氯膦酸二钠脂质体处理,连续给药一周,ALI组给予生理盐水处理。于1周处死小鼠,解剖取下肺脏标本,Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ蛋白的表达水平。3.分别加入转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）,血小板衍生生长因子（Platelet derived factor,PDGF）,胰岛素促生长因子（Insulin-like growth factors,IGF-1）连续培养AMP细胞4天,CCK-8检测AMP细胞的增殖。ALI-MΦ组建立ALI小鼠模型,N-MΦ组给予生理盐水处理,于一周处死小鼠,收集BALF。流式分选获得实验组小鼠CD206+/CD163+M2巨噬细胞（ALI-MΦ）及对照组小鼠肺泡CD68+巨噬细胞（N-MΦ）,Axin2阳性肌成纤维祖细胞（Axin2+Myofibrogenic Progenitor cell,AMP）细胞共培养。流式分析检测AMP细胞增殖,Western blot检测血管平滑肌蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ（CollagenⅠ）的表达水平。结果:1.与ALI后第1天和第3天相比,ALI后第7天CD68+/i NOS+M1巨噬细胞数量降低,而CD206+/CD163+M2型巨噬细胞数量增加,且均存在显着性差异（P<0.001）。2.与ALI组相比,ALI+CL组给予氯膦酸二钠脂质体后,Masson染色及α-SMA、CollagenⅠ免疫组化阳性水平降低,Western Blot结果显示α-SMA蛋白水平明显降低（p<0.05）,CollagenⅠ蛋白水平明显降低（P<0.01）。3.加入细胞因子TGF-β1,PDGF,IGF-1连续培养AMP细胞4天,AMP细胞增殖水平无明显变化。与N-MΦ组相比,ALI-MΦ组中AMP细胞的增殖水平升高,α-SMA蛋白表达上调。ALI-MΦ组细胞培养液上清中的CollagenⅠ含量也显着高于N-MΦ组（P<0.01）。结论:结论1在ALI后期即纤维化阶段,M1巨噬细胞向M2巨噬细胞转化。结论2在ALI小鼠模型中,通过CL处理消除体内巨噬细胞后,显着减轻了小鼠PF程度。结论3 M2型巨噬细胞可显着促进AMP的增殖、分化及胶原分泌。第二部分M2型巨噬细胞通过外泌体调控急性肺损伤后PF的机制探讨目的:建立ALI小鼠模型,探讨M2巨噬细胞外泌体调控PF的具体机制。方法:1.选用SPF级C57BL/6小鼠12只,6-8周龄,体重20-22 g,随机分为2组,实验组（ALI-MΦ-Exo组）腹腔内注射LPS,注射量:15 mg/kg。N-MΦ-Exo组注射等量生理盐水。于1周处死小鼠,PBS灌洗肺泡3次,取肺脏标本用于ALI和PF评估;PBS灌洗肺泡3次,收集BALF,ALI-MΦ-Exo组流式分选获得CD206+/CD163+M2型巨噬细胞,N-MΦ-Exo组流式分选获得CD68+。分别分离获得ALI小鼠肺泡M2巨噬细胞外泌体（ALI-MΦ-Exo）和正常小鼠肺泡巨噬细胞分泌外泌体（N-MΦ-Exo）,与AMP共培养。Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测AMP增殖水平,Western blot检测CollagenⅠ的表达水平,免疫荧光染色观察AMP形态及α-SMA的表达水平。2.比色法检测AMP总RNA中的N6-甲基腺嘌呤（N6-methyl-adenosine,m6A）的甲基化程度;Western blot检测AMP中METTL3蛋白的表达水平;q PCR检测AMP中METTL3 m RNA水平。3.收集ALI小鼠肺泡巨噬细胞外泌体（ALI-MΦ-Exo）及对照组小鼠肺泡巨噬细胞分泌外泌体（N-MΦ-Exo）,透射电镜观察外泌体大小形态。Western blot检测两种外泌体中METTL3蛋白的表达水平。结果:1.与ALI-MΦ相比,ALI-MΦ-Exo组AMP增殖水平显着升高,AMP细胞形态变成梭状,同时α-SMA表达上调;AMP培养基上清液CollagenⅠ含量显着上升（P<0.01）。2.ALI-MΦ-Exo组中AMP细胞中总RNA的m6A水平及METTL3蛋白表达水平显着高于ALI-MΦ-Exo组,而AMP细胞中METTL3 m RNA水平无显着差异。3.电镜观察N-MΦ-Exo组与ALI-MΦ-Exo组外泌体形态大小一致,CD63蛋白表达量一致。与N-MΦ-Exo组相比,ALI-MΦ-Exo组中M2巨噬细胞外泌体中METTL3蛋白水平显着升高（P<0.01）。结论:结论1在ALI小鼠模型中,M2型巨噬细胞外泌体可显着促进AMP增殖、肌成纤维细胞分化、胶原蛋白分泌。结论2经ALI后M2型巨噬细胞外泌体刺激AMP细胞,细胞中的m6A水平和METTL3蛋白水平升高。结论3在ALI小鼠中,M2巨噬细胞分泌的外泌体中携带的METTL3蛋白,通过m6A的修饰作用,促进AMP活化和纤维增生。
张勇[8]（2021）在《紫檀芪对LPS致肺损伤保护效果的初步研究与应用》文中进行了进一步梳理急性肺损伤（ALI）是动物饲养过程中严重的呼吸道疾病,严重威胁着畜禽的生命安全。越来越多的研究表明ALI的发生发展过程与炎症和氧化应激反应密不可分。因此,减轻炎症和氧化应激反应对于改善ALI具有重要意义。紫檀芪是一种具有生物活性的纯天然物质,多存在于常见的蓝莓、葡萄等植物中,有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗真菌等药理活性,同时越来越多的研究表明紫檀芪能够显着改善多种组织器官的损伤。本论文以紫檀芪为研究对象,建立LPS诱导的ALI小鼠模型,初步研究紫檀芪对其保护作用及其潜在机制。而后应用紫檀芪防治ALI雏鸡,观察紫檀芪对雏鸡的保护效果。首先,构建LPS诱导的ALI小鼠模型,分别用10、20和40 mg/kg紫檀芪对该模型进行预处理。其次,检测小鼠肺脏湿干重比值（W/D）的变化,并对其HE染色进行病理组织学观察;对支气管肺泡灌洗液（BALF）中总细胞、中性粒细胞、巨噬细胞进行计数,以及测定总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;然后,测定肺组织抗氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,以及氧化应激指标丙二醛（MDA）含量;qRT-PCR测定肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA表达变化;最后,Western blotting检测NF-κB信号转导通路中p-IκB和p-p65蛋白以及Nrf2/HO-1信号转导通路中Nrf2和HO-1蛋白水平。结果显示,LPS诱导的ALI小鼠模型构建成功;紫檀芪降低了ALI小鼠肺脏的W/D值,改善了肺组织损伤程度,如维持肺组织结构完整性、减轻肺间质水肿和肺泡壁增厚、减少浸润性炎性细胞等;减少BALF中总细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数目,以及总蛋白浓度;降低肺组织MPO活性;提高肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性,并降低MDA含量;降低肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA的表达;降低肺组织中p-IκB和p-p65蛋白水平,升高肺组织中Nrf2和HO-1蛋白水平。提示紫檀芪对ALI的保护作用机制主要是通过抑制NF-κB和激活Nrf2/HO-1信号转导通路,即抑制炎症反应和氧化应激反应。结果证实紫檀芪对LPS诱导的ALI小鼠模型具有保护作用,可作为治疗或保护LPS诱导的ALI雏鸡的候选药物。构建LPS诱导的ALI雏鸡模型,分别饲喂50、100和200 mg/kg紫檀芪对该模型进行处理。每日对雏鸡进行称重,并观察其采食量以及精神和体征状态;眼观肺脏形状、颜色、充血和坏死情况等组织病理学变化;检测雏鸡肺脏W/D的变化,并对其HE染色进行病理组织学观察;测定肺组织MPO活性;测定肺组织抗氧化应激指标SOD、CAT、GSH-Px活性,以及氧化应激指标MDA含量;qRT-PCR测定肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA表达变化。结果显示,LPS诱导的ALI雏鸡模型构建成功,但其每日采食量以及精神和体征状态并无明显异常;紫檀芪提升了ALI雏鸡的体重日增长率;雏鸡肺组织随着紫檀芪剂量的增加,形状和颜色逐渐趋于正常,充血和坏死情况有所改善;降低了ALI雏鸡肺脏的W/D值,改善了肺组织损伤程度,如维持肺组织结构完整性、减轻肺间质水肿和肺泡壁增厚、减少浸润性炎性细胞等;降低肺组织MPO活性;提高肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性,并降低MDA含量;降低肺组织中COX-2、i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β细胞因子mRNA的表达。结果证实紫檀芪对LPS诱导的ALI雏鸡模型具有保护作用。综上所述,本论文证实紫檀芪对LPS诱导的ALI小鼠模型发挥保护作用,并初步揭示其作用机制是通过抑制炎症和氧化应激反应来实现的,而应用紫檀芪防治雏鸡ALI也证实了良好的保护效果。以上结果不仅为生产实践中有效防治ALI提供借鉴和参考,而且也可为雏鸡功能性饲料添加剂的研发提供实验依据。
董兵[9]（2021）在《人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究》文中进行了进一步梳理背景:严重激素抵抗性哮喘（Severe steroid-resistant asthma,SSRA）是临床哮喘管理中一个严峻的问题。受影响的患者临床症状严重,生活质量恶化,且对哮喘一线治疗药物类固醇治疗无效,人们迫切需要行而有效的治疗方案。因此深入探讨与了解SSRA的发病机制,将有助于寻找到有效的治疗方案。气道炎症反应是SSRA发病的重要病理表现之一,也是介导疾病发生发展的关键因素。因此减轻气道炎症是控制哮喘症状的核心关键,免疫细胞及其相关的细胞因子在调节气道炎症和气道重塑过程中发挥着重要作用,其中巨噬细胞作为肺组织中最丰富的免疫细胞,参与气道炎症反应的过程。研究显示在不同的条件下,巨噬细胞又可极化为两种类型,即促进炎症反应的M1型,以及主要参与组织损伤修复的M2型。不同极化状态的巨噬细胞将影响气道炎症反应的进展与转归,因此调节巨噬细胞的极化表型可以作为SSRA新的治疗选择。间充质干细胞治疗作为一种可行有效的生物疗法,在免疫调节和组织损伤修复等方面具有显着的作用,其在治疗免疫相关性疾病方向上具有广阔的应用前景。目前研究认为,间充质干细胞的免疫调节作用主要归因于其旁分泌机制。间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）作为重要的旁分泌因子,具有其分泌细胞相似的免疫调节功能。并且MSC-Exo比间充质干细胞更适用于临床应用,因为纳米级的外泌体不会出现阻塞肺血管床以及免疫排斥等问题。MSC-Exo通过其强大的免疫调节作用已成为肺部炎性疾病最具有吸引力的治疗候选药物。然而,MSC-Exo如何发挥调节肺部炎症反应的作用,是否可以通过调节巨噬细胞极化从而发挥对SSRA的治疗作用尚不清楚。因此,阐明SSRA的内在免疫病理学机制,并为其临床治疗提供新的医疗策略具有重要的意义。目的:本研究拟探讨MSC-Exo是否能通过调节巨噬细胞极化表型的转变,减轻SSRA肺部炎症反应,并对可能的分子机制进行探究,为其转化应用于临床治疗提供理论支持与实验依据。方法:（1）利用Qiagen exo Easy Maxi Kit从人源脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cell,HUCMSC）培养基上清液中分离出外泌体,并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和流式细胞术对其进行鉴定。（2）构建OVA/CFA诱导的SSRA小鼠动物模型,进行支气管原位注射MSC-Exo治疗,通过对SSRA小鼠气道肺功能、肺组织病理学以及巨噬细胞极化相关细胞因子水平的检测,评估MSC-Exo对SSRA的治疗作用。（3）通过腹腔注射氯膦酸盐脂质体系统性清除小鼠体内的巨噬细胞,流式细胞术对清除效果进行鉴定,并进一步评估巨噬细胞清除后,MSC-Exo的治疗作用是否被减弱。（4）建立LPS刺激的RAW 264.7细胞的体外炎症模型,与MSC-Exo进行共培养,采用q RT-PCR、ELISA、Western blot、细胞免疫荧光和流式细胞术对M1和M2型巨噬细胞标志物进行检测,进一步探讨了MSC-Exo对巨噬细胞极化的调控作用及其相关机制。（5）采用串联质谱标签（Tandem Mass Tags,TMT）标记的定量蛋白质组学测序技术,检测MSC-Exo调控巨噬细胞极化过程中的蛋白表达谱的变化。（6）通过Western blot对蛋白质组学测序筛选得到的关键蛋白进行验证,并利用si RNA和过表达质粒转染技术进一步验证MSC-Exo作用的关键蛋白在巨噬细胞极化过程中的作用。结果:（1）成功从HUCMSC中分离得到颗粒直径集中于50-150nm之间,表面高表达特异性标志蛋白CD63和CD81,具有典型外泌体特征的圆形脂质双子层结构的碟状囊泡。（2）通过气管内给予MSC-Exo治疗可以有效改善SSRA小鼠的肺功能,减轻肺组织炎症细胞浸润,抑制气道粘液高分泌以及降低肺组织中炎症因子水平。（3）巨噬细胞的系统性清除削弱了MSC-Exo的治疗效果,提示巨噬细胞可能是MSC-Exo发挥免疫调节作用的靶点。（4）在LPS刺激的RAW264.7细胞的体外炎症模型中,发现MSC-Exo能抑制M1型巨噬细胞极化,促进了M2型巨噬细胞极化。（5）通过TMT标记的定量蛋白质组学测序分析,发现肿瘤坏死因子受体相关因子1（tumor necrosis factor receptor–associated factor 1,TRAF1）可能是MSC-Exo调控巨噬细胞极化的关键蛋白,并在体内体外模型中分别进行了验证,实验结果与蛋白质组学测序结果相一致。（6）在LPS刺激的RAW 264.7细胞的体外炎症模型中,利用TRAF1 si RNA和过表达质粒分别转染RAW 264.7细胞,并对相关蛋白通路进行验证,发现MSC-Exo对调控巨噬细胞极化的NF-κB和PI3K/AKT信号通路的影响依赖于TRAF1。结论:1.MSC-Exo能够减轻OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型的肺部炎症反应。2.MSC-Exo是通过巨噬细胞发挥对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠肺部炎症反应的抑制作用。3.MSC-Exo可能通过抑制TRAF1调节NF-κB和PI3K/AKT信号通路抑制巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化。创新性:1.本研究首次发现MSC-Exo对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型的治疗作用,补充了MSC-Exo作为SSRA候选治疗药物的开发价值,为制定新型有效的SSRA治疗策略提供了理论基础。2.本研究首次明确了巨噬细胞在MSC-Exo对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型治疗过程中的重要作用。3.本研究首次明确了MSC-Exo通过抑制TRAF1调节巨噬细胞极化治疗SSRA的分子机制。
寇娜[10]（2021）在《雾化吸入粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对博来霉素诱导间质性肺炎大鼠治疗作用的研究》文中提出肺癌是常见的恶性肿瘤,临床上常用的治疗药物为表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,但这类药物会产生非常严重的副作用,如间质性肺炎。目前,临床治疗间质性肺炎的策略主要是减轻炎症反应,延缓肺纤维化的进展,治疗药物主要以糖皮质激素及免疫抑制剂为主,但是治疗方法比较单一,没有针对病因和并发症实现个体化治疗。由于糖皮质激素毒副作用较大,长期使用会产生依赖性,而且可能会增加感染的几率和严重程度。因此,在本研究中,选用了具有抗炎、抗纤维化、抗凋亡、抗肿瘤及逆转肿瘤耐药等药理作用的粉防己碱为候选药物,采用反向微乳法制备了负载粉防己碱的海藻酸锌纳米凝胶,改善了粉防己碱的溶解度低和肺部消除过快的缺点,以雾化吸入为给药方式治疗博来霉素诱导的大鼠间质性肺炎。本文利用圆二色谱法分析海藻酸和锌离子形成水凝胶的分子机制,以反向微乳法制备粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶,以海藻酸钠浓度、氯化锌浓度、司盘-80（Span-80）和吐温-80（Tween-80）的配比为考察因素,以纳米凝胶粒径大小、多分散指数（Polydispersity index,PDI）、Zeta-电位为响应值,采用星点设计试验优化粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的制备工艺。通过纳米凝胶粒子的粒径及电位分析、透射电子显微镜（TEM）、傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、差示扫描量热分析（DSC）,对粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶进行了表征分析。以高效液相色谱法（HPLC）测定粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的载药率、包封率及体外累积释放率,评价纳米凝胶的体外释放行为。通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除实验,研究纳米凝胶的体外抗氧化性。采用一次性气管滴注博来霉素建立大鼠间质性肺炎模型,以超声雾化给药方式实现粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的肺部递送,考察不同浓度粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对急性期和慢性期间质性肺炎大鼠的治疗作用。利用Micro-CT对大鼠肺组织进行扫描和三维重建,观察大鼠肺部的影像学特征。通过H&E染色及Masson染色观察大鼠肺组织炎症和纤维化程度。以Real-time RT-PCR考察粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对大鼠间质性肺炎急性期和慢性期的作用机制。通过TUNEL染色实验检测急性期和慢性期间质性肺炎大鼠细胞凋亡的数目,通过免疫荧光和免疫组化实验检测慢性期间质性肺炎大鼠中纤维化相关蛋白的表达。星点试验结果显示,海藻酸钠浓度为1%、氯化锌浓度为0.25%、Tween-80:Span-80为1:1.85,为粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的最优处方。透射电镜显微照片显示纳米凝胶形态圆整,表面光滑,内部密度均匀,粒径小于100 nm。纳米凝胶粒子未发生聚集,分散性良好。FT-IR及DSC结果表明,粉防己碱完全被包裹在粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶体系中。利用高效液相色谱法测定粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的平均载药率为（1.59±0.07）%,平均包封率为（98.13±0.10）%。体外释放结果表明,粉防己碱纳米凝胶在72小时内的累积释放率为60.78%。DPPH实验结果表明,粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的抗氧化性均强于等浓度的粉防己碱。Micro-CT的图像显示,模型组的肺组织中第7天存在大片状浸润阴影,第28天出现明显的条索状阴影。这说明第7天时肺部有明显的炎症损伤,第28天时,大鼠肺部已出现了明显的纤维化指征。肺组织切片的Masson染色和H&E染色显微照片显示,模型组在第7天可见炎症细胞浸润,第28天时炎症浸润伴随胶原沉积。这些结果表明第7天时,肺组织内主要发生急性炎症反应,第28天时,肺组织已经从急性炎症期转为慢性炎症期,并且出现了明显的纤维化。TUNEL染色结果可以表明粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶在急性期和慢性期均可抑制肺组织细胞的凋亡。Real-time RT-PCR、免疫荧光和免疫组化的结果表明纳米凝胶通过抑制炎性因子（TNF-α、MCP-1）和细胞凋亡相关指标（Bax、Bcl-2、Bcl-xl）的表达以及减缓纤维化相关指标（TGF-β1、α-SMA、COL-I、COL-III、CTGF、VEGF、β-catenin、FN、MMP-9、TIMP-1）的表达,发挥治疗间质性肺炎的作用。结果表明,超声雾化吸入粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对间质性肺炎大鼠有治疗作用,为间质性肺炎提供了新的治疗策略。
二、Regulation of activity of nuclear factor-kB and activator protein-1 by nitric oxide, surfactant and glucocorticoids in alveolar macrophages from piglets with acute lung injury（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Regulation of activity of nuclear factor-kB and activator protein-1 by nitric oxide, surfactant and glucocorticoids in alveolar macrophages from piglets with acute lung injury（论文提纲范文）
（1）炎症反应中巨噬细胞极化机制和中药靶向治疗（论文提纲范文）
| 1巨噬细胞极化与表型 |
| 1.1 M1型巨噬细胞 |
| 1.2 M2型巨噬细胞 |
| 2巨噬细胞极化的关键信号通路 |
| 2.1 TLR4/NF-κB信号通路 |
| 2.2 MAPK信号通路 |
| 2.3 JAK/STAT信号通路 |
| 2.4 PI3K/AKT信号通路 |
| 2.5 PPAR-γ信号通路 |
| 3 M1型巨噬细胞与炎性器官损伤的联系 |
| 3.1炎症性肠病 |
| 3.3急性肺损伤 |
| 3.4急性脑损伤 |
| 4总结 |
（3）MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 ALI模型制备 |
| 1.2 小鼠肺组织病理学 |
| 1.3 免疫印迹 |
| 1.4 氧化应激标记分析 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组小鼠肺组织损伤评分比较 |
| 2.2 各组小鼠肺组织MAPKs、NF-κB和炎症介质活化比较 |
| 2.3 各组小鼠肺组织Nrf2、抗氧化酶表达和TBARS GSH比较 |
| 3 讨论 |
（6）扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 中药扶芳藤提取物、主要活性成分以及各萃取部位对炎症反应的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 扶芳藤提取物对LPS所致小鼠急性肺损伤的影响 |
| 2.2 MTT法测定扶芳藤提取物对RAW264.7细胞活力的影响 |
| 2.3 Griess法检测扶芳藤提取物对LPS诱导RAW264.7细胞分泌NO的影响 |
| 2.4 ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-6炎性因子分泌的影响 |
| 2.5 HPLC法测定正丁醇提取物的主要活性成分及含量 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞的影响及机制探究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对RAW264.7细胞活力的影响 |
| 2.2 醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌NO的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6的影响 |
| 2.4 醇对LPS诱导的RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、COX-2、iNOs、IL-6、IL-1β和TNF-α RNA表达的影响 |
| 2.5 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、蛋白表达的影响 |
| 2.6 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞NF-κB p65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的A549细胞的影响及机制的探究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对A549 细胞活力的影响 |
| 2.2 醇对LPS诱导A549细胞分泌NO的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导A549细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、COX-2、iNOs、IL-6、IL-1β和TNF-α RNA表达的影响 |
| 2.4 甜醇对LPS诱导A549细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65蛋白表达的影响 |
| 2.5 甜醇对LPS诱导A549 细胞NF-κBp65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第四部分 中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎作用及其作用机制探究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺湿质量/干质量比值的影响 |
| 2.2 甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺匀浆中IL-1β、TNF-α和IL-6含量的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠的肺组织病理学影响的影响 |
| 2.4 甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠BALF中总蛋白浓度和细胞渗出数的影响 |
| 2.5 甜醇对肺组织细胞中的TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65蛋白表达的影响 |
| 2.6 甜醇对肺组织细胞NF-κB p65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 炎症及其机制与急性肺损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）M2巨噬细胞在脂多糖诱导肺纤维化中的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 M2型巨噬细胞对急性肺损伤炎症反应的影响 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 仪器设备及耗材 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 操作及指标测定操作流程 |
| 2.5 统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 LPS诱发ALI1 周后,BALF中存在大量的M2 型巨噬细胞 |
| 3.2 LPS诱发ALI1 周后使用氯膦酸二钠脂质体,显着减轻小鼠PF |
| 3.3 ALI1 周小鼠BALF中分离获得的M2 型巨噬细胞,明显促进AMP增殖、肌成纤维细胞分化、胶原分泌 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 M2 巨噬细胞外泌体对急性肺损伤后调控PF的机制研究 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 仪器设备及耗材 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 操作及指标测定操流程 |
| 2.5 统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 ALI1 周小鼠BALF中 M2 型巨噬细胞分泌的外泌体,明显促进AMP增殖、肌成纤维细胞分化、胶原分泌 |
| 3.2 经M2 型巨噬细胞外泌体刺激,AMP中总RNA的 m6A和 METTL3蛋白水平显着升高,METTL3 m RNA水平无明显改变。 |
| 3.3 M2 型巨噬细胞外泌体中存在较高丰度的METTL3 蛋白 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 总结和展望 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 巨噬细胞在急性肺损伤/ARDS中的作用 |
| 参考文献 |
（8）紫檀芪对LPS致肺损伤保护效果的初步研究与应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写表 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 急性肺损伤研究进展 |
| 1 急性肺损伤概述 |
| 2 急性肺损伤发病机制 |
| 2.1 炎症反应 |
| 2.2 细胞凋亡 |
| 2.3 凝血/纤溶系统失衡 |
| 2.4 氧化应激 |
| 3 急性肺损伤治疗研究 |
| 3.1 机械通气治疗 |
| 3.2 药物治疗 |
| 4 常见急性肺损伤模型 |
| 4.1 机械通气法 |
| 4.2 LPS肺部或全身给药法 |
| 4.3 滴注活菌法 |
| 第二章 紫檀芪研究进展 |
| 1 紫檀芪理化性质 |
| 2 紫檀芪药理活性 |
| 2.1 紫檀芪的抗炎作用 |
| 2.2 紫檀芪的抗氧化作用 |
| 2.3 紫檀芪的抗肿瘤作用 |
| 2.4 紫檀芪的降血脂作用 |
| 2.5 紫檀芪的抑制真菌作用 |
| 3 紫檀芪检测方法 |
| 4 紫檀芪代谢研究 |
| 5 紫檀芪合成研究 |
| 第二篇 实验部分 |
| 第一章 紫檀芪对LPS致小鼠急性肺损伤保护效果的初步研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器及设备 |
| 1.4 所需试剂配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验分组及处理 |
| 2.2 小鼠急性肺损伤模型构建 |
| 2.3 实验样本采集 |
| 2.4 小鼠肺组织湿干重比值(W/D)的测定 |
| 2.5 小鼠肺组织病理学评估 |
| 2.6 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白浓度测定 |
| 2.7 小鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性的测定 |
| 2.8 小鼠肺组织氧化应激指标变化的测定 |
| 2.9 qRT-PCR检测小鼠肺组织中促炎性细胞因子mRNA的表达 |
| 2.10 Western blotting实验检测NF-κB和 Nrf2/HO-1 信号通路蛋白的表达 |
| 2.11 数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 紫檀芪降低LPS诱导的ALI小鼠肺组织湿干重比值(W/D) |
| 3.2 紫檀芪减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织病理学变化 |
| 3.3 紫檀芪降低LPS诱导的ALI小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞数目与蛋白浓度 |
| 3.4 紫檀芪降低LPS诱导的ALI小鼠肺组织MPO活性 |
| 3.5 紫檀芪提升LPS诱导的ALI小鼠肺组织抗氧化能力 |
| 3.6 紫檀芪抑制LPS诱导ALI小鼠肺组织中促炎性细胞因子mRNA表达 |
| 3.7 紫檀芪抑制LPS诱导的ALI小鼠肺组织中NF-κB信号转导通路 |
| 3.8 紫檀芪激活LPS诱导的ALI小鼠肺组织中Nrf2/HO-1信号转导通路 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 紫檀芪对LPS致雏鸡肺损伤保护效果的观察 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器及设备 |
| 1.4 所需试剂配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验分组及给药操作方法 |
| 2.2 实验样本采集 |
| 2.3 雏鸡肺组织眼观病变及湿干重比值(W/D)的测定 |
| 2.4 雏鸡肺组织病理学评估 |
| 2.5 雏鸡肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性的测定 |
| 2.6 雏鸡肺组织氧化应激指标变化的测定 |
| 2.7 qRT-PCR检测雏鸡肺组织中促炎性细胞因子mRNA的表达 |
| 2.8 数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 紫檀芪提升LPS致 ALI雏鸡体重增长率 |
| 3.2 紫檀芪减轻LPS致 ALI雏鸡肺脏眼观病变 |
| 3.3 紫檀芪降低LPS致 ALI雏鸡肺组织湿干重比值(W/D) |
| 3.4 紫檀芪减轻LPS致 ALI雏鸡肺组织病理学变化 |
| 3.5 紫檀芪降低LPS致 ALI雏鸡肺组织MPO活性 |
| 3.6 紫檀芪提升LPS致 ALI雏鸡肺组织抗氧化能力 |
| 3.7 紫檀芪抑制LPS致 ALI雏鸡肺组织中促炎性细胞因子mRNA表达 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（9）人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 严重激素抵抗性哮喘 |
| 1.1.1 严重激素抵抗性哮喘的定义 |
| 1.1.2 严重激素抵抗性哮喘的发病机制 |
| 1.1.3 严重激素抵抗性哮喘发病的分子机制 |
| 1.2 巨噬细胞与严重激素抵抗性哮喘 |
| 1.2.1 巨噬细胞的表型和功能 |
| 1.2.2 巨噬细胞在严重激素抵抗性哮喘中的作用 |
| 1.3 间充质干细胞治疗肺部疾病的作用 |
| 1.3.1 间充质干细胞的功能 |
| 1.3.2 间充质干细胞来源外泌体的生物学特性 |
| 1.3.3 间充质干细胞来源外泌体治疗肺部炎症疾病的研究现状 |
| 第2章 脐带间充质干细胞外泌体的分离与鉴定 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 实验细胞 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 主要实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 脐带间充质干细胞稳定细胞系的建立 |
| 2.3.2 脐带间充质干细胞的鉴定 |
| 2.3.3 脐带间充质干细胞外泌体的分离 |
| 2.3.4 脐带间充质干细胞外泌体的鉴定 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 脐带间充质干细胞的形态 |
| 2.4.2 脐带间充质干细胞的鉴定 |
| 2.4.3 透射电镜下脐带间充质干细胞外泌体的形态与结构 |
| 2.4.4 NTA粒径分析外泌体颗粒直径 |
| 2.4.5 流式细胞仪鉴定人脐带间充质干细胞外泌体表面标志蛋白 |
| 2.5 讨论 |
| 第3章 MSC-Exo对 OVA/CFA诱导的SSRA小鼠的治疗作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 主要实验仪器 |
| 3.3 主要实验方法 |
| 3.3.1 严重激素抵抗性哮喘(SSRA)模型的构建与实验分组 |
| 3.3.2 小鼠气道高反应性(AHR)检测 |
| 3.3.3 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的采集 |
| 3.3.4 小鼠肺组织的取样与处理 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测肺泡灌洗液BALF中性粒细胞比例 |
| 3.3.6 小鼠肺组织HE染色 |
| 3.3.7 小鼠肺组织PAS染色 |
| 3.3.8 小鼠肺组织免疫组化 |
| 3.3.9 小鼠肺组织总RNA提取 |
| 3.3.10 qRT-PCR实验检测肺组织中细胞因子的mRNA表达水平 |
| 3.3.11 ELISA检测小鼠肺组织匀浆上清样本中细胞因子水平 |
| 3.3.12 统计学处理 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 MSC-Exo对 SSRA小鼠AHR的影响 |
| 3.4.2 MSC-Exo对 SSRA小鼠气道中性粒细胞炎症的影响 |
| 3.4.3 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺部炎症的影响 |
| 3.4.4 MSC-Exo对 SSRA小鼠气道粘液高分泌的影响 |
| 3.4.5 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺组织中细胞因子表达水平的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 第4章 MSC-Exo通过调节巨噬细胞极化治疗SSRA |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验细胞 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.2.4 主要试剂的配制 |
| 4.2.5 主要实验仪器 |
| 4.3 主要实验方法 |
| 4.3.1 SSRA小鼠模型的构建、治疗及巨噬细胞清除实验 |
| 4.3.2 小鼠肺组织单细胞悬液的制备 |
| 4.3.3 小鼠腹腔灌洗液的制备 |
| 4.3.4 小鼠脾脏单细胞悬液的制备 |
| 4.3.5 流式细胞术检测小鼠体内巨噬细胞清除效果 |
| 4.3.6 巨噬细胞清除后小鼠AHR的检测 |
| 4.3.7 巨噬细胞清除后小鼠肺组织HE染色 |
| 4.3.8 小鼠肺组织总RNA提取 |
| 4.3.9 RAW264.7 细胞炎症模型的构建与处理 |
| 4.3.10 ELISA检测RAW264.7 细胞炎症模型的细胞因子表达水平 |
| 4.3.11 RAW264.7 细胞总RNA提取 |
| 4.3.12 qRT-PCR检测RAW264.7 细胞因子与极化标志分子mRNA水平 |
| 4.3.13 细胞免疫荧光检测RAW264.7 细胞极化标志物表达情况 |
| 4.3.14 小鼠肺组织与RAW264.7 细胞总蛋白提取 |
| 4.3.15 蛋白浓度测定 |
| 4.3.16 Western blot实验 |
| 4.3.17 统计学处理 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 氯膦酸盐脂质体对小鼠体内巨噬细胞的清除效率 |
| 4.4.2 巨噬细胞细胞清除后MSC-Exo对 SSRA小鼠AHR的影响 |
| 4.4.3 巨噬细胞细胞清除后MSC-Exo对 SSRA小鼠肺部炎症的影响 |
| 4.4.4 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺组织中巨噬细胞极化相关分子表达的影响 |
| 4.4.5 MSC-Exo对 RAW264.7 巨噬细胞极化的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 第5章 MSC-Exo通过抑制TRAF1 调节巨噬细胞极化及机制研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 实验细胞 |
| 5.2.3 实验试剂 |
| 5.2.4 主要试剂的配制 |
| 5.2.5 主要实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 RAW264.7 细胞炎症模型的构建与处理 |
| 5.3.2 TMT标记定量蛋白组测序样本的分组与准备 |
| 5.3.3 TMT标记定量蛋白组测序实验 |
| 5.3.4 TMT标记定量蛋白组测序结果分析 |
| 5.3.5 RAW264.7 细胞TRAF1 siRNA转染 |
| 5.3.6 RAW264.7 细胞TRAF1 过表达质粒转染 |
| 5.3.7 RAW264.7 细胞总蛋白提取 |
| 5.3.8 Western blot实验 |
| 5.3.9 统计学处理 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 MSC-Exo对 LPS刺激的RAW264.7 细胞蛋白表达谱的影响 |
| 5.4.2 MSC-Exo通过抑制TRAF1 表达调节巨噬细胞极化 |
| 5.4.3 MSC-Exo通过抑制TRAF1 调控极化相关信号通路NF-κB和PI3K/AKT |
| 5.5 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（10）雾化吸入粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对博来霉素诱导间质性肺炎大鼠治疗作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的制备与表征 |
| 1 实验材料与仪器 |
| 1.1 实验药品与试剂 |
| 1.2 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 圆二色光谱(CD) |
| 2.2 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶制备的工艺优化 |
| 2.3 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的制备 |
| 2.4 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶溶液Zeta-电位及粒径测定 |
| 2.5 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的透射电子显微镜(TEM)分析 |
| 2.6 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的差示扫描量热(DSC)分析 |
| 2.7 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的傅立叶变换红外光谱(FI-IR)分析 |
| 2.8 HPLC法测定粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的载药率和包封率 |
| 2.9 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶体外释放行为研究 |
| 2.10 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶体外抗氧化性研究 |
| 2.11 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 锌离子与海藻酸钠相互作用的圆二色谱分析 |
| 3.2 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的工艺优化分析 |
| 3.3 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶溶液Zeta电位及粒径分布结果 |
| 3.4 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的透射电子显微镜(TEM)分析 |
| 3.5 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的差示扫描量热(DSC)分析 |
| 3.6 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的傅立叶变换红外光谱(FI-IR)分析 |
| 3.7 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶的载药率和包封率测定 |
| 3.8 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶体外释放行为 |
| 3.9 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶体外抗氧化性分析 |
| 4 小结 |
| 第二章 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对急性间质性肺炎的治疗作用研究 |
| 1 实验材料和仪器 |
| 1.1 实验药品与试剂 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠模型的建立及实验动物分组 |
| 2.2 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠的肺组织影像学研究 |
| 2.3 动物肺组织样本收集及肺系数测定 |
| 2.4 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的病理学研究 |
| 2.5 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织中相关基因mRNA表达水平测定 |
| 2.6 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的TUNEL染色研究 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验动物总体外观观察 |
| 3.2 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠的体重变化曲线分析 |
| 3.3 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠的生存曲线分析 |
| 3.4 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的Micro-CT图分析 |
| 3.5 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的三维重建图分析 |
| 3.6 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的肺系数测定 |
| 3.7 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织病理学分析 |
| 3.8 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织中相关基因mRNA表达水平测定 |
| 3.9 博来霉素诱导急性间质性肺炎大鼠肺组织的TUNEL染色结果 |
| 4 小结 |
| 第三章 粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对慢性间质性肺炎的治疗作用研究 |
| 1 实验材料与仪器 |
| 1.1 实验药品与试剂 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠模型的建立及实验动物分组 |
| 2.2 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠的肺组织影像学研究 |
| 2.3 动物肺组织样本收集及肺系数测定 |
| 2.4 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的病理学研究 |
| 2.5 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织中相关基因mRNA表达水平测定 |
| 2.6 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的免疫荧光分析 |
| 2.7 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的免疫组化分析 |
| 2.8 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的TUNEL染色研究 |
| 2.9 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验动物一般观察和肺组织形态学观察 |
| 3.2 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠的体重变化曲线分析 |
| 3.3 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠的生存曲线分析 |
| 3.4 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的Micro-CT图分析 |
| 3.5 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的三维重建图分析 |
| 3.6 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的肺系数测定 |
| 3.7 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织病理学分析 |
| 3.8 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织中相关基因mRNA表达水平测定 |
| 3.9 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的免疫荧光分析结果 |
| 3.10 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的免疫组化分析结果 |
| 3.11 博来霉素诱导慢性间质性肺炎大鼠肺组织的TUNEL染色结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 雾化吸入给药的文献计量学及可视化分析 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、Regulation of activity of nuclear factor-kB and activator protein-1 by nitric oxide, surfactant and glucocorticoids in alveolar macrophages from piglets with acute lung injury（论文参考文献）
- [1]炎症反应中巨噬细胞极化机制和中药靶向治疗[J]. 陈浪,郇轩,余武汉,李腾飞,肖国辉,张有成. 生命的化学, 2021
- [2]靶向巨噬细胞免疫球蛋白样凝集素9治疗慢性阻塞性肺疾病的研究进展[J]. 葛林阳,徐双兰,陈子,周林福. 中华结核和呼吸杂志, 2021(12)
- [3]MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制[J]. 王强,林飞,胡召锟,林锦源,黄冰,潘灵辉. 广东医学, 2021(08)
- [4]杨梅素对脓毒症相关急性肺损伤保护作用与机制的研究[D]. 徐海博. 河北医科大学, 2021
- [5]ROS介导的JNK/c-Jun信号通路在纳米SiO2影响A549细胞SP-A、SP-B表达中的作用研究[D]. 杨盼. 华北理工大学, 2021
- [6]扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究[D]. 郑璐. 山西医科大学, 2021(01)
- [7]M2巨噬细胞在脂多糖诱导肺纤维化中的作用及机制[D]. 石小云. 南昌大学, 2021(01)
- [8]紫檀芪对LPS致肺损伤保护效果的初步研究与应用[D]. 张勇. 吉林大学, 2021(01)
- [9]人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究[D]. 董兵. 吉林大学, 2021(01)
- [10]雾化吸入粉防己碱-海藻酸锌纳米凝胶对博来霉素诱导间质性肺炎大鼠治疗作用的研究[D]. 寇娜. 天津中医药大学, 2021(01)