问：请问什么叫QPCR
- 答：（Polymerase Chain Reaction简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势，因而在相关方法和仪器方面的研发非常快，成为分子生物学诊断的主流，至今仍处于学术和应用前沿，发展至今已有三代产品：第一代PCR定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪（DNA Thermal Cycler）+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成；第二代PCR-DNA终点定量技术及裤毕设备（End-point quantitative PCR detection）由基因扩增热循环仪弯纯卖+荧光仪+终点定量试剂构成，其又分为终点酶免定量（End-point ELISA-PCR）和终点荧光定量（End-point Flour-PCR）两种；第三代产品为QPCR-DNA/RNA实时荧光定量检测。 QPCR检测灵敏度高，检测线性范围宽，检测精度和重复性好等突出优势，因此被公认为当今世界用于临床的最先进分子诊断技术，被美国FDA承认并推崇。被美国FDA批准并取得临床应用执照的QPCR试剂品种有：HBV DNA，丙肝病毒HCV RNA，艾滋病病毒HIV RNA，沙眼衣原体CT，淋病双球菌NG，CMV，Mtb等。实时荧光PCR仪研发技术难度大，门槛高，发达国家也只有有限几家知名公司生埋逗产，且售价昂贵，在50－120万元。 可见，在病人看来，哪家医院应用了QPCR技术便是先进诊断技术的象征，在发达国家也是如此。参考资料：
问：高度保守的两个基因，如何做qPCR？
- 答：QPCR至少有以下特点：
所用仪器少，只用一台仪器。
检测时间短，只须45分闷丛纯钟～1小时10分钟（试剂各异），而定性PCR须3～4小时，酶免终点定量须6～8小时，荧光终点定量须2～3小时。
操作极其简单：前处理后，样本插入仪器一小时后到电脑上来出报告即可郑锋，无须开盖，移样本（以前方法），避免污染。
结果精确：定性PCR只能定性，很粗略，终点定量PCR由于只能在40个热循环结束后检测荧光，被测荧光达到饱和导致定量不够精确，属于半定蚂咐量状态。而实时荧光QPCR是在扩增的每时每刻连续检测各样本的荧光值的变化。
问：高通量qPCR芯片是否有生物学重复的要求？
- 答：一般来说高通量qPCR芯片要求有3个或3个以上的生物学重复，才能保证后续的分析结果能计算标准差和检验值等，便于后续唤培晌研究成果用中仿于和锋论文、报告和文章。
