肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用

一、肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用（论文文献综述）

卓明,叶军明,王万辉,钟茂林,刘金龙^[1]（2021）在《缺血预/后处理对肠缺血再灌注损伤保护作用的研究进展》文中进行了进一步梳理肠缺血再灌注（Ischemic reperfusion,IR）损伤多见于失血性休克、大面积烧伤、体外循环、小肠或肝移植等常见病理生理过程,可直接引起肠黏膜损伤、肠黏膜屏障功能障碍,还可进一步引起远端脏器损伤、多器官功能障碍综合征（Multiple organ dysfunction syndrome,MODS）甚至死亡。缺血预处理（Ischemic preconditioning,IPC）及缺血后处理（Ischemic postconditioning,IPO）分别指发生IR前/后给予反复、短暂的缺血再灌注,诱导机体产生内源性保护机制,增强组织器官对IR的耐受能力,减轻损伤。目前,关于缺血预/后处理对肠IR的保护作用相关研究已较为多见,本文对肠IR发生机制、缺血预/后处理方案及作用机制等进行综述。

刘可可^[2]（2021）在《右美托咪定对体外循环下肠缺血再灌注损伤保护机制的研究》文中提出目的:通过在猪体外循环中,持续静脉泵注右美托咪定,研究其对体外循环所导致的肠缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:健康清洁小猪9头,随机分为正常对照组（A组）、体外循环组（B组）、体外循环+右美组（C组）,每组三头。A组全身麻醉后开胸,不做体外循环处理。B、C两组在A组基础上,行体外循环。当猪心脏停跳时间达1小时后,逐渐停机使其心脏复跳,复跳时间达2小时后,经主动脉快速放血将猪处死,随后开腹收集回肠组织以制作标本。术中经动脉采集各组血液标本。将肠组织标本均分为两份,分别置于-80℃冰箱和浓度为2.5%的戊二醛内固定保存。检测血清中D-乳酸浓度和二胺氧化酶（DAO）的活性;肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及白介素-6（IL-6）的浓度;电镜下观察肠内皮细胞线粒体结构变化。结果:与A组对比,B、C两组血清中的D-乳酸的浓度和DAO的活性均增加（P<0.05）;B组的变化幅度高于C组（P<0.05）。B、C两组肠组织内TNF-α及IL-6的浓度增高大于A组（P<0.05）;C组增高趋势低于B组（P<0.05）。电镜下B、C两组肠内皮细胞线粒体有明显损伤,且B组损伤程度重于C组。结论:右美托咪定可通过抑制肠组织在体外循环损伤时的炎症反应及线粒体保护等途径发挥对肠道的保护作用。

陈嘉希^[3]（2020）在《丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究》文中研究指明目的:观察丹酚酸B预处理对肠缺血再灌注大鼠的保护作用,并对其作用机制进行初步研究。方法:本次实验设置了阴性对照组和模型组,丹酚酸B给药组也设置相应的对照组和模型组,每组中随机配备雄性SD大鼠12只,通过夹闭肠系膜上动脉,制造肠道缺血,时间维持60min,随后再灌注24h从而得到实验所需的肠缺血再灌注模型。测定各组大鼠血清中的CAT、SOD、GSH、MDA含量,测定各组大鼠回肠组织中CAT、SOD、GSH、MDA以及TNF-α、IL-1β、IL-6等因子的含量;检测其髓过氧化物酶（MPO）活性、NF-κB p65水平;肠粘膜通透性的测定运用异硫氰酸荧光素（FITC）结合葡聚糖的方法。取1cm回肠组织的进行HE染色,观察对应切片的病理学变化,并进行Chiu’s评分;分析TNF-α、IL-1β、IL-6的含量与NF-κB p65的表达是否存在相关性;分析TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65水平与Chiu’s评分是否存在相关性。此外,还将采用RT-PCR法和Western Blot法测定各组大鼠回肠组织PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达以及蛋白水平。结果:1.模型组大鼠血清中MDA水平较阴性对照组明显升高,抗氧化剂SOD、CAT、GSH的含量则显着降低（P<0.01）。与模型组进行比较,丹酚酸B+模型组大鼠血清中的MDA含量显着降低,而抗氧化剂SOD、CAT、GSH的含量则有所升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。2.相较于阴性对照组,模型组大鼠回肠组织中MDA的含量明显升高,而抗氧化剂SOD、CAT和GSH均表现出明显下降的趋势,差异具备统计学意义（P<0.01）。与模型组相比,丹酚酸B+模型组大鼠回肠组织中MDA水平大幅下降,而抗氧化剂SOD、CAT和GSH均呈现大幅升高,差异明显（P<0.01）。3.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织中的TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均大幅增加（P<0.01）。而丹酚酸B+模型组相较于模型组,上述指标含量均明显降低,差异具备统计学意义（P<0.01）。4.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织匀浆的MPO和NF-κB p65水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠的MPO水平和NF-κB p65降低,差异极显着（P<0.01）。5.与阴性对照组比较,模型组大鼠血清中的FITC-葡聚糖含量大幅增加,其粘膜通透性升高。相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠血浆中的FITC-葡聚糖的含量减少,肠黏膜通透性降低,差异极显着（P<0.01）。6.与阴性对照组比较,模型组中大鼠肠道粘膜受损严重,毛细血管破裂,导致腺体功能受损,并可发现中性粒细胞浸润现象,Chiu’s的评分明显增加（P<0.01）;相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠肠道黏膜轻微损伤,Chiu’s评分降低,差异极显着（P<0.01）。7.以回肠组织内IL-1β、IL-6、TNF-α含量与NF-κB p65水平的为指标,在大鼠肠缺血再灌注损伤过程中,分析二者的相关性发现呈显着的正相关,对应的相关系数依次为0.932、0.949、0.937（P<0.01）;肠缺血再灌注大鼠回肠组织中的IL-1β、IL-6、TNF-α及NF-κB p65含量与回肠组织的Chui’s评分均呈显着正相关,相关系数分别为0.901、0.884、0.873、0.898（P<0.01）。8.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织中PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达降低,差异极显着（P<0.01）;对比模型组大鼠,丹酚酸B+模型组回肠组织中的PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达明显升高（P<0.01）。9.将模型组大鼠与阴性对照组比较可以发现,模型组大鼠回肠组织中PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;与模型组大鼠进行对比,丹酚酸B+模型组回肠组织中的PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的蛋白水平显着升高,差异显着（P<0.01）。结论:1.丹酚酸B能够有效降低缺血再灌注对机体造成的损伤,作用机理涉及抑制氧化反应、改善肠粘膜的通透性和抑制炎症反应。2.丹酚酸B可能通过对NF-κB信号通路的调节,从而发挥其对IL-1β、IL-6、TNF-α表达的抑制作用。3.丹酚酸B可能通过调节PI3K/Akt信号通路,从而减轻、改善肠道缺血再灌注损伤。

刘可可,王江^[4]（2020）在《远隔器官缺血再灌注致肠损伤机制研究进展》文中研究说明缺血再灌注损伤是临床常见的病理生理过程。脑、肝脏、肢体、肾脏等缺血再灌注除导致器官本身损伤外,还可导致远隔器官如肠损伤。脑缺血再灌注致肠损伤机制与神经分泌功能异常、神经肽调节失衡、自由基损伤、血栓素和前列环素比例失衡、肿瘤坏死因子α作用等密切相关。肝缺血再灌注引起肠损伤的原因尚不完全清楚,其机制可能与内毒素刺激、氧自由基生成、炎症反应、线粒体损伤、钙超载等有关。当缺血肢体恢复血供后,在造成局部肢体损伤的同时,包括小肠在内的多组织器官亦可受到损伤,其机制主要与自由基生成、中性粒细胞活化、补体激活、细胞凋亡、一氧化氮作用减弱等有关。肾脏缺血再灌注致肠损伤的机制与自由基增多、炎症反应爆发、钙内流增多、细胞凋亡等多种因素有关。

张力尹^[5]（2020）在《异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制》文中进行了进一步梳理目的:探讨异丙酚预处理是否能通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路激活,进而减轻肠缺血再灌注损伤。方法:选取48只雄性成年SD大鼠随机分为三组:假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）和异丙酚组（P组）,每组16只,体重210-250g。使用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉90min,再灌注2h,建立肠I/R模型。P组在夹闭肠系膜上动脉前30 min,经腹腔注射异丙酚100mg/kg;Sham组和I/R组腹腔注射等体积脂肪乳（异丙酚的溶剂）。通过苏木素-伊红染色（hematoxylin and eosin,HE）观察小肠粘膜的形态学变化,并进行肠组织Chiu’s评分;采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测NLRP3、caspase-1 p20、occludin、cleaved caspase-3、bax和bcl-2蛋白表达水平;通过免疫荧光（Immunofluorescence）染色观察肠道NLRP3、caspase-1 p20蛋白的表达情况;采用原位末端标记法（terminal dexynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL）检测肠道细胞凋亡情况;进一步通过酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清中炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）的表达水平。实验数据均使用SPSS 21.0统计软件进行分析,多个样本均数间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小显着性差异检验（least significant difference,LSD）;采用Pearson相关系数分析NLRP3和caspase-1 p20蛋白与小肠Chiu’s评分的相关性。P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.HE染色结果显示,与Sham组比较,I/R组大鼠小肠粘膜损伤明显加重,Chiu’s评分明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与I/R组比较,P组小肠粘膜损伤明显减轻,Chiu’s评分显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）;Sham组与P组之间比较,差异有统计学意义（P<0.01）。2.Western Blot检测结果显示,与Sham组比较,I/R组的NLRP3、caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达均明显上调,差异有统计学意义（P<0.01）,occludin、bcl-2的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义（P<0.01）。与I/R组比较,P组的NLRP3、caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义（P<0.01）,occludin、bcl-2的蛋白表达均明显上调,差异有统计学意义（P<0.01）。与Sham组比较,P组的NLRP3的蛋白表达有所上调（P<0.01）,occludin和bcl-2的蛋白表达有所下调（P<0.01）,差异有统计学意义;caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达无明显统计学差异（P>0.05）。3.免疫荧光染色结果显示,与Sham组比较,I/R组肠道NLRP3和caspase-1 p20的表达明显增强,平均荧光强度显着提高（P<0.01）;与I/R组比较,P组的NLRP3和caspase-1 p20的表达明显减弱,平均荧光强度显着下降（P<0.01）;与Sham组比较,P组NLRP3和caspase-1 p20的表达有所增强,平均荧光强度有所提高（P<0.01）。4.TUNEL染色结果显示,各组小肠粘膜细胞凋亡比率分别为:Sham组为（3.15±1.41）%,I/R组为（59.96±9.76）%,P组为（13.12±1.9）%。I/R组和P组小肠粘膜细胞凋亡比率均高于Sham组（P<0.01）,但P组小肠粘膜细胞凋亡比率显着低于I/R组（P<0.01）。5.ELISA检测结果显示,与Sham组比较,I/R组和P组血清中IL-1β和IL-18的水平明显升高（P<0.01）;与I/R组比较,P组血清中IL-1β和IL-18的水平明显下降（P<0.01）。6.Pearson相关性显示,NLRP3和caspase-1p20蛋白与小肠Chiu’s评分有显着正相关性（P<0.01）。结论:1.肠缺血再灌注可以导致肠道NLRP3/caspase-1信号通路激活。2.异丙酚预处理可能部分通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路激活,发挥抗炎和抗凋亡作用,减轻肠缺血再灌注所致肠道损伤。

陈琦^[6]（2020）在《探究桃红四物汤在大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤中对三磷酸肌醇受体（IP3R）的影响》文中进行了进一步梳理目的:基于Wnt/Ca2+信号通路,探究中药方剂桃红四物汤在大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤（Limb Ischemia Reperfusion Injury,LIRI）过程中,是否通过抑制三磷酸肌醇受体（IP3R）的表达来减轻炎症反应。方法:将48只2月龄雄性SD大鼠按随机数表随机分为正常对照组N（normal）12只,缺血再灌注组模型组M（model）12只、桃红四物液组T（taohongsiwuye）12只和阻断剂组B（block）12只等4个大组,各大组再以缺血再灌注后第2、4、6、8小时等时间点分为4个小组,所有实验大鼠分别于各时间点处死并取材检验,采用HE染色观察腓肠肌细胞形态,DAPI荧光染色法检测腓肠肌细胞核,ELISA法检测炎症因子的表达,实时定量PCR和western-blotting检测IP3R的表达。结果:HE染色观察腓肠肌细胞形态:HE染色观察腓肠肌细胞形态:正常对照组N组大鼠腓肠肌纤维组织结构排列整齐,呈长索状,肌纤维结构清晰,可见丰富肌髓。每条肌纤维中课件紧密相连于肌膜内表面的几个细胞核,核大小均匀,着色均匀,无异常改变;缺血再灌注组模型组M组课件腓肠肌纤维紊乱,呈不规则形,肌纤维水肿增厚,呈片状排列。肌肉纤维完整性、持续破坏、肌肉纤维变薄、肌纤维间裂缝扩大、肌肉细胞破坏和肌肉纤维炎性浸润;桃红四物液组T组腓肌观察仍有肠肌纤维炎性浸润,但相比模型组程度较轻;阻断剂组B组腓肠肌纤维可见细胞不同程度受损,肌纤维遭受轻度破坏,但纤维间排列整齐,炎性浸润不明显。DAPI荧光染色法检测腓肠肌细胞核:（1）与正常组比较,模型组凋亡细胞数量明显偏高,荧光强度明显偏强;与正常组比较,桃红四物液组凋亡细胞数明显减少,荧光强度明显偏强。（2）与模型组比较,桃红四物液组凋亡细胞数和荧光强度明显偏低;与模型组比较,阻断剂组凋亡细胞数和荧光强度明显偏低。ELISA法检测IL-1β、IL-6和TNF-α的表达:（1）与正常组相比,模型组、桃红四物液组、阻断剂组三组大鼠炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌的巨噬细胞炎症因子明显增强。（2）与模型组相比,桃红四物液组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均明显降低,阻断剂组炎症因子IL-1β和TNF-α的表达明显低于桃红四物液组,而桃红四物汤组和阻断剂组IL-6浓度无显着性差异。实时定量PCR和western-blotting检测IP3R:通过制造缺血再灌注损伤模型后,IP3R蛋白均显着上调高于正常水平,但桃红四物液组与阻断剂组经桃红四物液预处理后,IP3R的表达明显下调,甚至降至正常组水平。结论:在骨骼肌缺血再灌注损伤的Wnt/Ca2+信号通路中,桃红四物汤可以通过抑制IP3R的表达减轻炎症反应,而缓解缺血再灌注损伤。

周富强^[7]（2019）在《大鼠肢体缺血—再灌注损伤骨骼肌中Wnt-5a、PKC的表达变化研究及桃红四物液的干预作用》文中提出目的:研究大鼠肢体-缺血再灌注损伤（LI-RI）过程中骨骼肌组织中Wnt-5a、蛋白激酶C（protein kinase C PKC）的表达变化及桃红四物液预处理后对其表达的影响,进一步从分子水平探讨导致LI-RI的病理机制及桃红四物液对LI-RI的治疗作用。方法:78只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组（M-IR组）、桃红四物液组（T-IR组）以及磷脂酶C阻断剂组（P-IR组）等四组,其中正常组大鼠不造成缺血处理,其余M-IR组、T-IR组及P-IR组在造模成功后按恢复灌注后0h、2h、4h、8h等时间点分组。取材后采用HE染色、荧光定量PCR检测等分子生物学技术观察大鼠腓肠肌形态变化及检测腓肠肌组织中Wnt-5a、PKC的表达变化,并对检测所得数据进行统计学处理。结果:除正常组外,M-IR组、T-IR组及P-IR组大鼠HE染色结果显示均出现腓肠肌纤维不同程度增粗、水肿,纤维间间隙较正常明显增宽并结构紊乱,同时伴有不同程度炎性渗出及细胞凋亡。与正常组相比较,M-IR组、T-IR组及P-IR组大鼠腓肠肌组织中Wnt-5a、PKC的mRNA表达均不同程度升高,组间对比差异有统计学意义（P<0.05）,且T-IR组及P-IR组中Wnt-5a、PKCmRNA的相对表达量在恢复灌注后相同时间点较M-IR组均降低（P<0.05）。结论:1.肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌组织中Wnt-5a、PKC的表达均不同程度升高,骨骼肌损伤严重,表明LI-RI大鼠骨骼肌组织损伤可能与Wnt-5a、PKC的高表达密切相关。2.桃红四物液能够降低LI-RI大鼠骨骼肌组织中Wnt-5a、PKC的高表达,从而减轻LI-RI程度,对骨骼肌具有一定的保护作用。

杨新静^[8]（2018）在《丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤的保护作用及其机制研究》文中认为第一部分 丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤的保护作用目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠（Tanshinone ⅡA sodium sulfonate,TSS）预处理对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠脓毒症肠损伤的保护作用。方法:实验1:6周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机表法分为2组:LPS 15只和TSS+LPS组15只。LPS组采用腹腔注射LPS 30mg/kg建立脓毒症小鼠模型;TSS+LPS组预先腹腔注射TSS 30mg/kg,0.5h后注射LPS 30mg/kg。每12小时观察小鼠死亡情况,观察小鼠LPS刺激后120h内的存活情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线。实验2:6周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机表法分为3组:对照组（Control组）30只,LPS组30只和TSS+LPS组30只。正常对照组予以腹腔注射等体积生理盐水;LPS组采用腹腔注射LPS 30mg/kg建立脓毒症小鼠模型;TSS+LPS组预先腹腔注射TSS 30mg/kg,0.5h 后注射 LPS 30mg/kg。LPS 注射后 1h、6h、12h 分别处死小鼠,取空肠和回肠标本待检。HE染色评价空肠和回肠的病理损伤情况。结果:对照组空肠和回肠粘膜表层完整,绒毛排列整齐;LPS组小鼠空肠和回肠粘膜水肿,炎症细胞浸润,绒毛塌陷。对小肠绒毛的长度统计学分析显示,与对照组相比,LPS诱导1h、6h、12h时,空肠和回肠绒毛均明显缩短（P<0.05）。与LPS组相比,丹参酮ⅡA磺酸钠能够明显减轻不同时间点空肠和回肠绒毛水肿及炎症细胞浸润。与LPS组相比,在LPS刺激1h时,丹参酮ⅡA磺酸钠不能改善空肠和回肠绒毛的缩短情况,在LPS刺激6、12h时丹参酮ⅡA磺酸钠均能够明显抑制空肠和回肠绒毛的缩短（P<0.05）,结果表明丹参酮ⅡA磺酸钠能够改善LPS诱导的小鼠空肠和回肠的肠道病理性损伤。与LPS组比较,丹参酮ⅡA磺酸钠预处理使小鼠48h生存率提高40%,而 120h 生存率提高 26.67%（P<0.05）。结论:LPS成功诱导小鼠空肠和回肠的急性损伤,丹参酮ⅡA磺酸钠能够明显减轻LPS刺激后空肠和回肠绒毛的水肿及炎症细胞浸润,并改善空肠和回肠绒毛缩短的情况,提高小鼠的生存率。第二部分 丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤炎症因子的影响目的:探讨丹生酮 ⅡA 磺酸钠（Tanshinone ⅡA sodium sulfonate,TSS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠肠损伤的炎症因子的影响。方法:6周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机表法分为3组:对照组（Control组）30只,LPS组30只和TSS+LPS组30只。正常对照组予以腹腔注射等体积生理盐水;LPS组采用腹腔注射LPS 30mg/kg建立脓毒症小鼠模型;TSS+LPS组预先腹腔注射TSS 30mg/kg,0.5h后注射LPS 30mg/kg。LPS注射后1h、6h、12h处死小鼠,取空肠标本待检。采用酶联免疫吸附测定试剂盒（enzyme linked immunosorbent assay kit,ELISA）和实时定量荧光聚合酶链式反应（Real-time PCR,RT-PCR）检测空肠组织中促炎因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1 β,IL-1β）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）的表达;RT-PCR 检测抑炎因子白介素-10（interleukin-6,IL-10）和转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）的表达。结果:与对照组相比,LPS明显上调了促炎症因子TNF-α、IL-β、IL-6的mRNA和蛋白水平的表达,并上调了抑炎因子IL-10和TGF-β的mRNA水平（P<0.05）。LPS刺激1h时TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和TGF-β开始增加,并且在6h时出现明显的下降。与LPS组相比,丹生酮ⅡA磺酸钠在LPS刺激1h、6h、12h均能够明显下调TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA和蛋白水平,并上调IL-10和TGF-β的mRNA水平（P<0.05）。结论:丹生酮ⅡA磺酸钠能够抑制促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6和上调抑炎因子IL-10和TGF-β的表达水平,这可能是其改善LPS诱导的肠损伤的机制之一。第三部分 丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤自噬的影响目的:探讨脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的肠上皮的自噬的变化趋势;并研究丹生酮ⅡA磺酸钠（Tanshinone ⅡA sodium sulfonate,TSS）对LPS诱导的小鼠肠损伤的自噬的影响。方法:6周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机表法分为3组:对照组（Control组）30只,LPS组30只和TSS+LPS组30只。正常对照组予以腹腔注射等体积生理盐水;LPS组采用腹腔注射LPS 30mg/kg建立脓毒症小鼠模型;TSS+LPS组预先腹腔注射TSS 30mg/kg,0.5h后注射LPS 30mg/kg。LPS注射后1h、6h、12h处死小鼠,取空肠标本待检。用RT-PCR法和免疫印迹法（Western blot法）检测空肠组织中自噬相关蛋白Microtubule-associated protein 1 light chain 3（MAP1-LC3,LC3）、Beclin-1 表达量的变化。透射电镜观察各组小鼠肠上皮细胞内的自噬体的变化,并统计自噬体的数量。结果:与对照组相比,当LPS刺激1h、6h、12h时,LPS下调了空肠上皮自噬标志蛋白Beclin-1和LC3的mRNA和蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值（P<0.05）。与LPS组相比,在LPS刺激1h时TSS+LPS组空肠的自噬水平出现下降;然而在LPS刺激6h、12h时丹生酮ⅡA磺酸钠均能够明显上调Beclin-1和LC3的mRNA和蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值（P<0.05）。透射电镜观察各组小鼠空肠上皮细胞内的自噬体的变化,结果显示:LPS组在各个时间点均未发现自噬体的典型结构,而TSS+LPS组在LPS刺激1h、6h、12h均能发现自噬体,与LPS组相比有统计学差异（P<0.05）。结论:丹生酮ⅡA磺酸钠能够上调LPS诱导的肠损伤的自噬水平,这可能是丹生酮ⅡA磺酸钠改善LPS诱导的肠损伤的作用机制之一。

李丽萌,郑晓春,郑艇,黄风怡,陈江湖,涂文劭^[9]（2018）在《肢体缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注诱发肠损伤和脑损伤的影响》文中研究表明目的评价肢体缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注诱发肠损伤和脑损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠48只,6～8周龄,体重200～250 g,采用随机数字表法分为3组（n=16）:假手术组（Sham组）、肝缺血再灌注组（I/R组）和肢体缺血预处理组（LIP组）。LIP组右侧腹股沟处以弹力橡皮止血带环形捆扎阻断下肢血流10 min时,松开止血带恢复灌注30 min。然后I/R组和LIP组采用Pringle法阻断门静脉、肝动脉及胆总管30 min后恢复灌注的方法制备肝缺血再灌注损伤模型。再灌注6 h时,每组取8只大鼠,心尖取血样采用放免法检测血浆TNF-α和IL-10的浓度,然后处死大鼠,取小肠组织和脑组织,采用Chiu评分法评价肠黏膜损伤程度,采用比色法测定肠粘膜髓过氧化物酶（MPO）活性,光镜下观察脑组织病理学结果,电镜下观察脑组织超微结构。再灌注6 h时,每组取8只大鼠,经1 min尾静脉注射伊文氏蓝（EB）2 mg/kg,处死取脑组织,测定EB含量,计算含水率。结果与Sham组比较,I/R组和LIP组肠黏膜Chiu评分和肠组织MPO活性升高,脑组织含水率和EB含量升高,血浆TNF-α和IL-10的浓度升高（P<0.05）;与I/R组比较,LIP组肠黏膜Chiu评分和肠组织MPO活性降低,脑组织含水率和EB含量降低,血浆IL-10浓度升高（P<0.05）,血浆TNF-α浓度差异无统计学意义（P>0.05）,脑组织病理学损伤减轻。结论肢体缺血预处理可减轻大鼠肝缺血再灌注诱发肠损伤和脑损伤,其机制可能与抑制全身炎症反应有关。

康于庆,黄再青,刘慧,何志强,朱俊峰,古妙宁^[10]（2016）在《PI3K/Akt信号通路在盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬中的作用》文中进行了进一步梳理目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）信号通路在盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬中的作用。方法健康成年雄性SPF级SD大鼠64只,体重220250 g,采用随机数字表法分为4组（n=16）:假手术组（S组）、肢体缺血再灌注组（LIR组）、盐酸戊乙奎醚处理组（PHC组）和盐酸戊乙奎醚+PI3K抑制剂3-甲基腺嘌呤组（PM组）。采用夹闭股动脉3 h,再灌注4 h的方法制备大鼠肢体缺血再灌注损伤模型。于再灌注前15 min时,S组和LIR组静脉注射生理盐水1 ml,PHC组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15 mg/kg,PM组静脉注射盐酸戊乙奎醚0.15mg/kg,同时腹腔注射3-甲基腺嘌呤10 mg/kg。于再灌注4 h时,取静脉血样,采用ELISA法测定血清内毒素（LPS）和LDH水平;取肠组织,荧光显微镜下观察自噬小体;采用Western blot法检测肠组织自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ（LC3Ⅰ）和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）的表达,计算LC3Ⅱ与LC3Ⅰ表达水平的比值（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）。结果与S组比较,LIR组和PM组血清LPS和LDH水平升高,肠组织Beclin-1表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高（P<0.05或0.01）,自噬小体增多,PHC组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）;与LIR组比较,PHC组血清LPS和LDH水平降低,肠组织Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ降低（P<0.05或0.01）,自噬小体减少,PM组上述指标差异无统计学意义（P>0.05）;与PHC组比较,PM组血清LPS和LDH水平升高,肠组织Beclin-1表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高（P<0.05或0.01）,自噬小体增多。结论盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬的机制与激活PI3K/Akt信号通路有关。

二、肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用（论文提纲范文）

（1）缺血预/后处理对肠缺血再灌注损伤保护作用的研究进展（论文提纲范文）

（2）右美托咪定对体外循环下肠缺血再灌注损伤保护机制的研究（论文提纲范文）

（3）丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究（论文提纲范文）

（4）远隔器官缺血再灌注致肠损伤机制研究进展（论文提纲范文）

（5）异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制（论文提纲范文）

（6）探究桃红四物汤在大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤中对三磷酸肌醇受体（IP3R）的影响（论文提纲范文）

（7）大鼠肢体缺血—再灌注损伤骨骼肌中Wnt-5a、PKC的表达变化研究及桃红四物液的干预作用（论文提纲范文）

（8）丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）

四、肢体缺血再灌注致肠损伤及丹参的保护作用（论文参考文献）

• [1]缺血预/后处理对肠缺血再灌注损伤保护作用的研究进展[J]. 卓明,叶军明,王万辉,钟茂林,刘金龙. 赣南医学院学报, 2021(06)
• [2]右美托咪定对体外循环下肠缺血再灌注损伤保护机制的研究[D]. 刘可可. 新疆医科大学, 2021
• [3]丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究[D]. 陈嘉希. 南昌大学, 2020(01)
• [4]远隔器官缺血再灌注致肠损伤机制研究进展[J]. 刘可可,王江. 山东医药, 2020(20)
• [5]异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制[D]. 张力尹. 西南医科大学, 2020(12)
• [6]探究桃红四物汤在大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤中对三磷酸肌醇受体（IP3R）的影响[D]. 陈琦. 湖南中医药大学, 2020(03)
• [7]大鼠肢体缺血—再灌注损伤骨骼肌中Wnt-5a、PKC的表达变化研究及桃红四物液的干预作用[D]. 周富强. 湖南中医药大学, 2019(02)
• [8]丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS诱导的小鼠肠损伤的保护作用及其机制研究[D]. 杨新静. 苏州大学, 2018(04)
• [9]肢体缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注诱发肠损伤和脑损伤的影响[J]. 李丽萌,郑晓春,郑艇,黄风怡,陈江湖,涂文劭. 中华麻醉学杂志, 2018(01)
• [10]PI3K/Akt信号通路在盐酸戊乙奎醚抑制肢体缺血再灌注大鼠肠组织自噬中的作用[J]. 康于庆,黄再青,刘慧,何志强,朱俊峰,古妙宁. 中华麻醉学杂志, 2016(08)

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